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目的构建靶向EZH2基因的短发夹RNA（shRNA）重组表达载体，探讨抑制EZH2基因表达对结直肠癌细胞增殖的影响。方法根据EZH2cDNA序列设计具有短发夹结构的DNA序列，构建重组表达载体，鉴定后转染至swg80细胞。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Westernblot检测EZH2基因的抑制效果，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测EZH2抑制对SW480细胞增殖的影响。结果EZH2基因shRNA表达质粒转染48h后，基因沉默组和阴性对照组细胞中EZH2mRNA的相对表达水平分别为0．339±0．013和1．968±0．072，EZH2蛋白的相对表达水平分别为0．229±0．008和1．1684-0．053，基因沉默组均明显低于阴性对照组（P〈0．01，P〈0．05）。转染后48、72h，细胞生长抑制率分别为30．7％和25．9％，与空白对照组比较细胞生长受到明显抑制（P〈0．05）。结论靶向EZH2基因的shRNA重组表达载体构建成功，并能显著抑制EZH2基因的表达。沉默EZH2基因能明显抑制结直肠癌细胞的增殖。