【摘 要】
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目的建立酶联免疫吸附分析方法(ELISA)检测待测样品中的人源化抗体MIL50。方法用原核表达的重组蓖麻毒素(ricin)A链(RTA)突变体(RiVax)为包被抗原,与辣根过氧化物酶(HRP)标记
【机 构】
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军事医学科学院基础医学研究所; 上海交通大学医学院; 军事医学科学院毒物药物研究所;
【基金项目】
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军事医学科学院军事医学创新基金资助项目(2012CXJJ011)
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目的建立酶联免疫吸附分析方法(ELISA)检测待测样品中的人源化抗体MIL50。方法用原核表达的重组蓖麻毒素(ricin)A链(RTA)突变体(RiVax)为包被抗原,与辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗人IgG建立的夹心ELISA,检测生物样品中的人源化抗体MIL50。结果以蓖麻毒素和RiVax包被抗原,ELISA检测MIL50的结果显示,RiVax可与MIL50特异性结合,结合能力不低于全毒素蛋白,可以用于MIL50的定量分析。RiVax的包被浓度为3 mg/L,对于溶解于含有吐温20(Tween 20)磷酸缓冲液(PBST)中的MIL50的检测灵敏度可达0.030 mg/L;与PBST样品相比较,含有同样浓度MIL50的大鼠血清ELISA的阳性结果明显减弱,不同的大鼠组织匀浆对于MIL50的检测有不同程度的干扰。结论夹心ELISA能够有效地用于人源化蓖麻毒素抗体MIL50的检测分析。
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