探讨固醇调节元件结合蛋白–1c (SREBP–1c)对骨骼肌细胞胰岛素受体底物–1(IRS–1)的调控机制，以明确SREBP–1c在高脂诱导骨骼肌胰岛素抵抗中的作用。
方法L6细胞经2%胎牛血清(FBS)诱导分化成肌管细胞，经500 μmol/L棕榈酸(PA)处理建立胰岛素抵抗模型。采用Western印迹检测L6肌管细胞经PA处理后0.5、1、3、6、12、24、48 h的SREBP–1c、p–IRS–1(Tyr608/612)、IRS–1、p–AKT(Ser473)、AKT的蛋白表达。检测L6肌管细胞过表达SREBP–1c或用肝X受体(LXR)激动剂TO901317(5 μmol/L)处理后SREBP–1c、脂肪酸合成酶(FAS)及胰岛素信号通路相关分子的蛋白表达。采用双荧光素酶报告基因实验分析SREBP–1c转录因子对IRS–1启动子区域的调控作用。
结果L6肌管细胞经PA处理后，SREBP–1c蛋白表达在1 h后即显著增高，胰岛素信号通路蛋白p–IRS–1(Tyr608/612)、IRS–1及p–AKT(Ser473)表达在6 h后显著下降，AKT蛋白表达无变化。L6肌管细胞经LXR激动剂TO901317处理后SREBP–1c、FAS基因及蛋白表达增高，IRS–1基因表达下降，p–IRS–1(Tyr608/612)、IRS–1及p–AKT(Ser473)/AKT蛋白表达下降。L6肌管细胞过表达SREBP–1c后相关蛋白出现与LXR激动剂干预相似的变化。双荧光素酶报告基因实验结果显示SREBP–1c显著抑制IRS–1的启动子活性，SREBP–1c DNA结合域的酪氨酸突变成丙氨酸后则对IRS–1启动子无作用。
结论SREBP–1c通过抑制IRS–1基因转录表达而影响胰岛素信号通路，在高脂诱导骨骼肌胰岛素抵抗中起关键作用。