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【摘要】糖尿病肾病（diabetic nephropathy DN）是糖尿病的常见并发症和主要死亡原因之一，是影响人类健康的重大问题。近年来其发病率不断上升，在西方国家它己成为导致终末期肾脏病的最主要病因，在我国其发病率也逐年升高。为糖尿病的微血管并发症之一，和血管等几乎所有肾脏结构。其引起的肾脏损害累及肾小球、肾小管、DN作肾间质其临床表现和疾病进程亦有别于原发性肾小球肾炎，一旦出现肾功能损害，其进展速度远快于非糖尿病肾病患者，且发展至终末期肾功能衰竭时，无论给予透析还是肾移植，患者远期预后仍差于其他肾脏疾病。因此早期诊断和干预具有重要临床意义。
【关键词】糖尿病肾病；尿液；检验
前言
尿微量白蛋白是目前公认的DN早期筛查指标，但临床上一旦检测到微量白蛋白尿，而部分尿白蛋白正常患者，其肾小球滤过率已出现下降，肾脏病理也表现出糖尿病肾病的特征性改变。随着饮食和生活方式的改变，我国2型糖尿病的发生率逐渐升高。糖尿病肾病在肾活检患者中的检出率也逐年上升，成为终末期肾功能衰竭的重要原因之一。DN患者临床上一旦出现肾功能不全，其病情进展迅速，预后差，因此早期诊断有着重要意义。
一、对象与方法
（一）病例选择
选取某院肾脏病研究所临床确诊的男性2型糖尿病患者，依据尿蛋白水平分为3组：尿白蛋白正常组：尿白蛋白排泄率<17mg/24h；微量白蛋白尿组：100mg/24h < UAER < 300mg/24h：蛋白尿组：尿蛋白1-3 g/24h。每组患者2例，并满足以下条件：年龄30-65岁，无肉眼血尿，尿沉渣红细胞<100/ul；排除合并心脏、肝胆、甲状腺病及肾功能不全，排除近3月体重改变>10%的患者，可伴或不伴高血一压、血脂代谢异常。以年龄匹配的健康成年男性25例为对照，均无肥胖、高血压、糖脂代谢紊乱等病史。入组者禁食12小时，记录尿液体积，留取清晨空腹血清、中段尿标木，-80℃保存待测。
（二）临床资料收集
一般状况：年龄、身高、体重、体重指数、糖尿病病程、收缩压、舒张压：
代谢水平：空腹及餐后血糖、糖化血红蛋白（HbAlc）、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、尿酸；
肾脏损伤指标：24小时尿微量白蛋白或尿蛋白水平、镜下血尿、血清肌配；糖尿病并发症：视网膜病变、神经病变等微血管并发症及冠心病、脑血管疾病、周围血管病变等大血管并发症；
药物使用：磺脉类、双皿类、胰岛素及血管紧张素转化酶抑制剂/血管紧张素II受体拮抗剂使用情况。
（三）试剂和仪器
试剂：系列烷烃标准溶液（C8-C40）及毗咙购于Fluka公司；甲基肉豆栽酸、盐酸甲氧胺及甲基硬脂酸购于Sigma-Aldrich公司；MSTFA+1 % TMCS购于Pierce公司；正庚烷（Merck）；甲醇（Tedia）。
仪器：岛津GC/MS联用仪（GCMS-QP2010）；岛津液相色谱仪（ProminenceUFLCXR）；AB SCIEX TripleTOFTM 5600质谱仪；减压浓缩装置购于Thermo公司；高速冷冻离心机（SORVALL.Biofuge stratos）气相色谱质谱（GCIMS）标本处理及衍生化测定时，血清经37 °C解冻15 min，取50 u1血清加甲醇（含内标甲基肉豆范酸12.S ug/ml），涡旋提取5 min后4°C静置1 h，20 OOOg离心10 min，取上清100 ml于GC小瓶，减压挥干溶剂。加入甲氧胺毗咤溶液（l0mg/ml），涡旋4 min后肪化反应向GC小瓶中17h。加MSTFA（含1 % TMCS作为催化剂），涡旋1 min后三甲硅烷基化反应1h。最后加入外标甲基硬脂酸庚烷液（30 ug/ml），涡旋4 min后即可作为待测样品。尿标本，1600g离心1 Omin，在SOuI尿中加入50 IU尿素酶（溶解于SOuI生理盐水中），置37 °C水浴保温2小时，充分反应以去除过量尿素。20000g离心10分钟分离沉淀后取上清液50 u1置于GC小瓶中，同上法处理和分析。
（四）液相色谱/质谱
标本处理尿液经37°C解冻20 min。50 u1标本中加入甲醇200u1沉淀蛋白，涡旋1 min后，12000g离心lSmin。取上清200u1，0.22um微孔过滤，加入自动取样小瓶，待测。
样品采集色谱条件：色谱柱为C18柱（2.1 * 100 mm，1.7um），进样量5ul，流速为500ul/min；流动相由1%的甲酸水溶液（A）和1%的甲酸乙睛溶液组成；流动相B开始比例为10%，维持3min：在3u1Omin浓度线性升高至55%；第10min升高至95%，并维持至第SSmin；第65min降至初始比例10%，平衡3min。
（五）数据处理
计量资料以均数士标准差或中位数表示，计数资料以百分率表示。多组间计量资料的比较采用One-Way ANOVA或Kruskal-Wallis H检验，两组间计量资料的比较采用Tukey HSD或Mann-Whitney U检验。计数资料比较采用扩检验。数据分析采用SPSS 13.0软件，结果以P < 0.05为差异有统计学意义，P < 0.01为差异有显著统计学意义。
二、结果
（一）患者临床特征
通过结果得知3组患者的年龄及糖尿病病程等一般情况未见显著差异，但蛋白尿组患者，其空腹、餐后血糖、HbAI。及甘油三酷水平均高于单纯糖尿病组及微量白蛋白尿组，并有统计学意义。随肾脏病变进展，患者合并高血压、视网膜病变和大血管并发症的比例逐渐升高。治疗方而，3组患者均使用了不同种类的口服降糖药及胰岛素治疗，后两组患者的ACEI/ARB使用率较高。 *P<0.05 vs尿白蛋白正常组，P<0.05 vs微量白蛋白尿组；UA：尿酸；ACEI/ARB：血管紧张素转化酶抑制剂/血管紧张素II受体拮抗剂尿液中检测到的化合物
GC/MS：尿液中检测到119个峰，其中59种化合物被鉴定。如所示，各组间的总离子流图存在差异。
LC/MS检测到到的化合物很多，但仅少数得到鉴定，其中尿液正离子模式65种，负离子模式50种。
（二）多元数据分析结果
下图为不同组别患者尿液GC/MS检测到的化合物经均严格执行消毒隔离制度及无菌操作规程。进行可能接触患者体液的操作时，必须戴手套。污染的手套及时脱去。由于全体护理人员防护意识较强，病房内无职业暴露发生，无交叉感染发生。
3 小结
HIV感染合并肠梗阻的护理对于护理人员来说是一个严峻的挑战。由于护士要进行多种有创操作，接触医疗废弃物、污染物及病人体液的机会较多，所以职业危险性较高。这要求护理人员具备较高的职业素质，丰富的专业理论知识和娴熟的操作技能，严格遵守消毒隔离制度和无菌操作规程，在做好护理的同时，加强职业防护，防止医源性感染的发生。
参考文献：
[1]Gottlieb MS，Schroff R，Schanker HM，et al.Pneumocystis carini pneumonia and mucosal candidiasis in previously healthy homosexual men：evidence of a new acquired cellular immunodeficiency[J].N Eng J Med，1981，305（24）：1425.
[2]卫生部疾病预防控制局.2011年中国艾滋病疫情估计报告[EB/OL].[2012-01-21].http：//www.moh.gov.cn/publicfiles/business/htmlfiles/mohjbyfkzj/s3586/201201/53957.htm
[3]郭莉.艾滋病医源性传播及预防[J].中华护理杂志，2003，38（10）：819-820.Maltêz F，Doroana M，Branco T，et al.Recent advances in antiretroviral treatment and prevention in HIV-infected patients[J].Curr Opin HIV AIDS，2011，6（Suppl 1）：S21-30.
【关键词】糖尿病肾病；尿液；检验
前言
尿微量白蛋白是目前公认的DN早期筛查指标，但临床上一旦检测到微量白蛋白尿，而部分尿白蛋白正常患者，其肾小球滤过率已出现下降，肾脏病理也表现出糖尿病肾病的特征性改变。随着饮食和生活方式的改变，我国2型糖尿病的发生率逐渐升高。糖尿病肾病在肾活检患者中的检出率也逐年上升，成为终末期肾功能衰竭的重要原因之一。DN患者临床上一旦出现肾功能不全，其病情进展迅速，预后差，因此早期诊断有着重要意义。
一、对象与方法
（一）病例选择
选取某院肾脏病研究所临床确诊的男性2型糖尿病患者，依据尿蛋白水平分为3组：尿白蛋白正常组：尿白蛋白排泄率<17mg/24h；微量白蛋白尿组：100mg/24h < UAER < 300mg/24h：蛋白尿组：尿蛋白1-3 g/24h。每组患者2例，并满足以下条件：年龄30-65岁，无肉眼血尿，尿沉渣红细胞<100/ul；排除合并心脏、肝胆、甲状腺病及肾功能不全，排除近3月体重改变>10%的患者，可伴或不伴高血一压、血脂代谢异常。以年龄匹配的健康成年男性25例为对照，均无肥胖、高血压、糖脂代谢紊乱等病史。入组者禁食12小时，记录尿液体积，留取清晨空腹血清、中段尿标木，-80℃保存待测。
（二）临床资料收集
一般状况：年龄、身高、体重、体重指数、糖尿病病程、收缩压、舒张压：
代谢水平：空腹及餐后血糖、糖化血红蛋白（HbAlc）、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、尿酸；
肾脏损伤指标：24小时尿微量白蛋白或尿蛋白水平、镜下血尿、血清肌配；糖尿病并发症：视网膜病变、神经病变等微血管并发症及冠心病、脑血管疾病、周围血管病变等大血管并发症；
药物使用：磺脉类、双皿类、胰岛素及血管紧张素转化酶抑制剂/血管紧张素II受体拮抗剂使用情况。
（三）试剂和仪器
试剂：系列烷烃标准溶液（C8-C40）及毗咙购于Fluka公司；甲基肉豆栽酸、盐酸甲氧胺及甲基硬脂酸购于Sigma-Aldrich公司；MSTFA+1 % TMCS购于Pierce公司；正庚烷（Merck）；甲醇（Tedia）。
仪器：岛津GC/MS联用仪（GCMS-QP2010）；岛津液相色谱仪（ProminenceUFLCXR）；AB SCIEX TripleTOFTM 5600质谱仪；减压浓缩装置购于Thermo公司；高速冷冻离心机（SORVALL.Biofuge stratos）气相色谱质谱（GCIMS）标本处理及衍生化测定时，血清经37 °C解冻15 min，取50 u1血清加甲醇（含内标甲基肉豆范酸12.S ug/ml），涡旋提取5 min后4°C静置1 h，20 OOOg离心10 min，取上清100 ml于GC小瓶，减压挥干溶剂。加入甲氧胺毗咤溶液（l0mg/ml），涡旋4 min后肪化反应向GC小瓶中17h。加MSTFA（含1 % TMCS作为催化剂），涡旋1 min后三甲硅烷基化反应1h。最后加入外标甲基硬脂酸庚烷液（30 ug/ml），涡旋4 min后即可作为待测样品。尿标本，1600g离心1 Omin，在SOuI尿中加入50 IU尿素酶（溶解于SOuI生理盐水中），置37 °C水浴保温2小时，充分反应以去除过量尿素。20000g离心10分钟分离沉淀后取上清液50 u1置于GC小瓶中，同上法处理和分析。
（四）液相色谱/质谱
标本处理尿液经37°C解冻20 min。50 u1标本中加入甲醇200u1沉淀蛋白，涡旋1 min后，12000g离心lSmin。取上清200u1，0.22um微孔过滤，加入自动取样小瓶，待测。
样品采集色谱条件：色谱柱为C18柱（2.1 * 100 mm，1.7um），进样量5ul，流速为500ul/min；流动相由1%的甲酸水溶液（A）和1%的甲酸乙睛溶液组成；流动相B开始比例为10%，维持3min：在3u1Omin浓度线性升高至55%；第10min升高至95%，并维持至第SSmin；第65min降至初始比例10%，平衡3min。
（五）数据处理
计量资料以均数士标准差或中位数表示，计数资料以百分率表示。多组间计量资料的比较采用One-Way ANOVA或Kruskal-Wallis H检验，两组间计量资料的比较采用Tukey HSD或Mann-Whitney U检验。计数资料比较采用扩检验。数据分析采用SPSS 13.0软件，结果以P < 0.05为差异有统计学意义，P < 0.01为差异有显著统计学意义。
二、结果
（一）患者临床特征
通过结果得知3组患者的年龄及糖尿病病程等一般情况未见显著差异，但蛋白尿组患者，其空腹、餐后血糖、HbAI。及甘油三酷水平均高于单纯糖尿病组及微量白蛋白尿组，并有统计学意义。随肾脏病变进展，患者合并高血压、视网膜病变和大血管并发症的比例逐渐升高。治疗方而，3组患者均使用了不同种类的口服降糖药及胰岛素治疗，后两组患者的ACEI/ARB使用率较高。 *P<0.05 vs尿白蛋白正常组，P<0.05 vs微量白蛋白尿组；UA：尿酸；ACEI/ARB：血管紧张素转化酶抑制剂/血管紧张素II受体拮抗剂尿液中检测到的化合物
GC/MS：尿液中检测到119个峰，其中59种化合物被鉴定。如所示，各组间的总离子流图存在差异。
LC/MS检测到到的化合物很多，但仅少数得到鉴定，其中尿液正离子模式65种，负离子模式50种。
（二）多元数据分析结果
下图为不同组别患者尿液GC/MS检测到的化合物经均严格执行消毒隔离制度及无菌操作规程。进行可能接触患者体液的操作时，必须戴手套。污染的手套及时脱去。由于全体护理人员防护意识较强，病房内无职业暴露发生，无交叉感染发生。
3 小结
HIV感染合并肠梗阻的护理对于护理人员来说是一个严峻的挑战。由于护士要进行多种有创操作，接触医疗废弃物、污染物及病人体液的机会较多，所以职业危险性较高。这要求护理人员具备较高的职业素质，丰富的专业理论知识和娴熟的操作技能，严格遵守消毒隔离制度和无菌操作规程，在做好护理的同时，加强职业防护，防止医源性感染的发生。
参考文献：
[1]Gottlieb MS，Schroff R，Schanker HM，et al.Pneumocystis carini pneumonia and mucosal candidiasis in previously healthy homosexual men：evidence of a new acquired cellular immunodeficiency[J].N Eng J Med，1981，305（24）：1425.
[2]卫生部疾病预防控制局.2011年中国艾滋病疫情估计报告[EB/OL].[2012-01-21].http：//www.moh.gov.cn/publicfiles/business/htmlfiles/mohjbyfkzj/s3586/201201/53957.htm
[3]郭莉.艾滋病医源性传播及预防[J].中华护理杂志，2003，38（10）：819-820.Maltêz F，Doroana M，Branco T，et al.Recent advances in antiretroviral treatment and prevention in HIV-infected patients[J].Curr Opin HIV AIDS，2011，6（Suppl 1）：S21-30.