目的 观察以腺相关病毒(rAAV)为载体的血管内皮生长因子(VEGF)反义基因转染的骨肉瘤细胞中VEGF蛋白的表达.方法用不同量(0、20、50、100、200、240 μl)的以rAAV为载体包装的反义VEGF基因(rAAV-anti VEGF)转染人骨肉瘤细胞系MG-63细胞,收集转染前后的培养细胞及上清,用链霉素抗生素蛋白-过氧化酶连接法(SP)和免疫印迹法(Western-blot)检测VEGF蛋白的表达;用逆转录聚合酶链式反应(PCR)检测VEGFmRNA表达.结果 SP结果表明转染rAAV-antiVEGF基因的量越多,显色越淡;Western-Blot结果表明转染rAAV-antiVEGF基因的量越多,其灰度越低.测得不同量(0、20、50、100、200、240 μl)的转染基因其相应的吸光度值分别为86 614±13 776、73 245±15 414、61 078±12 124、54 657±10 953、39 802±11 308、32 014±15 057,差异有显著性(P<0.05);PCR检测其灰度值分别为0.986、0.913、0.784、0.606、0.431、0.408,差异有显著性(P<0.05).结论 rAAV-antiVEGF可封闭VEGFmRNA,使已转染rAAV-antiVEGF的MG-63细胞表达的VEGF蛋白减少。