【摘 要】
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链霉菌C3662的发酵液上清经80%硫酸铵沉淀,DEAE-Sepharose和CM-Sepharose层析分离后纯化出一种纤溶酶.SDS-PAGE显示为单一的条带,分子量约为30kD.以pIJ699为载体,S.lividans
【机 构】
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中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所,中国医学科学院中国协和医科大
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链霉菌C3662的发酵液上清经80%硫酸铵沉淀,DEAE-Sepharose和CM-Sepharose层析分离后纯化出一种纤溶酶.SDS-PAGE显示为单一的条带,分子量约为30kD.以pIJ699为载体,S.lividans TK24为宿主菌,鸟枪法克隆纤溶酶基因,从3000个转化子中挑选到1个具活性转化子,经亚克隆,序列测定得到一个903bp的完整ORF,其GC%为68.33%,密码子第三位GC%为95.6%,符合链霉菌基因的典型特征.与多种蛋白酶具有较高的同源性.
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