小鼠骨保护素配基胞外片段的表达、纯化及生物活性分析

来源 :遗传学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kzyzf

【摘要】

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骨保护素配基(OPGL)是调节破骨细胞分化和成熟的核心细胞因子.由小鼠骨组织提取总RNA,RT-PCR扩增得到小鼠OPGL胞外片段(sOPGL) cDNA,以特定策略克隆入表达载体pET-42a(+),以

【作者】

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王宝利邱明才郭刚梁东春张镜宇

【机构】

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天津医科大学总医院内分泌科

【出处】

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遗传学报

【发表日期】

：

2004年7期

【关键词】

：

骨保护素配基表达纯化大肠杆菌 osteoprotegerin ligandexpressionpurificationEscherichia coli

【基金项目】

：

国家自然科学基金，天津市自然科学基金

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骨保护素配基(OPGL)是调节破骨细胞分化和成熟的核心细胞因子.由小鼠骨组织提取总RNA,RT-PCR扩增得到小鼠OPGL胞外片段(sOPGL) cDNA,以特定策略克隆入表达载体pET-42a(+),以便使未来表达产物的融合标签序列能够完全被因子Xa切除.重组载体在大肠杆菌中诱导表达可获得高水平的47 kD产物,Western blotting证实它可被OPGL抗体识别.经Glutathione-sepharose 4B亲和层析,除融合蛋白外,还有一约30 kD蛋白与层析柱发生了特异性亲和.该30 kD

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