知母皂苷BⅡ对大鼠神经干细胞向酪氨酸羟化酶阳性神经元分化的影响

来源 :中华行为医学与脑科学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pandaab
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目的

探讨知母皂苷BII (timosaponin B-II,TB-II)对大鼠来源的神经干细胞(neural stem cells,NSCs)向酪氨酸羟化酶阳性(tyrosine Hydroxylase,TH)神经元分化的影响。

方法

原代培养大鼠神经干细胞,采用细胞增殖计数法、形态学观察和免疫组化等方法鉴定NSCs的自我增殖能力和多向分化的生物学功能。取第三代(P3)NSCs,设立无添加TB-II的血清自然分化组为对照组,TB-II实验组依次添加10 μg/ml、30 μg/ml和100 μg/ml ,作用7 d。采用免疫组织化学方法检测TH在各组的表达情况;Western blot法检测分化细胞TH蛋白表达的程度。

结果

(1)所培养细胞具备自我增殖能力,表达nestin蛋白,分化为神经元和神经胶质细胞,符合神经干细胞生物学属性。(2)与对照组相比,TB-II 30 μg/ml剂量组和TB-II 100 μg/ml剂量组TH阳性细胞比率均升高[(10.03±1.36)%,(20.01±3.37)%,(31.32±3.98)%],差异有统计学意义(t=16.54,6.15,均P<0.05)。TB-II 10 μg/ml组与对照组比较差异无统计学意义(t=18.36,P>0.05)。(3)Western结果显示,与对照组比较,TB-II 30 μg/ml剂量组和TB-II 100 μg/ml组的TH蛋白的相对表达量升高,差异有统计学意义[对照组:(1.02±0.24),TB-II 30 μg/ml剂量组:(3.64±1.78),TB-II 100 μg/ml剂量组:(5.88±2.34);t=12.58,9.15,均P<0.05]。TB-II 10 μg/ml组与对照组比较差异无统计学意义(t=16.42,P>0.05)。

结论

TB-II可促进NSCs向TH阳性神经元分化。

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