【摘 要】
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目的探讨血小板源性生长因子受体α（plateletderivedgrowthfactorreceptoralpha，PDGFRα）对小鼠锌指蛋白阳性间充质干细胞（glioma-associatedoncogenehomolog1-positivemesenchymalstemcells，Gli1 -MSC）双向分化的调控作用。方法繁育双报告转基因小鼠ROSAmT/mG/Gli1-CreERt2/PDGFRαfl（实验组）和ROSAmT/mG/Gli1-CreERt2（对照组），选取两组4周龄小鼠各20只，
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心 华中科技大学同济医学院口腔医学院 口腔颌面发育与再生湖北省重点实验室，武汉 430030华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心 华中科技大学同济
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目的探讨血小板源性生长因子受体α（platelet derived growth factor receptor alpha，PDGFRα）对小鼠锌指蛋白阳性间充质干细胞（glioma-associated oncogene homolog 1-positive mesenchymal stem cells，Gli1 -MSC）双向分化的调控作用。
方法繁育双报告转基因小鼠ROSAmT/mG/Gli1-CreERt2/PDGFRαfl（实验组）和ROSAmT/mG/Gli1-CreERt2（对照组），选取两组4周龄小鼠各20只，从小鼠主动脉外膜中分离间充质干细胞，使用他莫昔芬诱导，通过绿色荧光蛋白标记和流式细胞仪分选，筛选两组Gli1 -MSC，实验组Gli1 -MSC中条件性敲除PDGFRα，对照组Gli1 -MSC正常表达PDGFRα。对两组Gli1 -MSC分别进行成脂肪诱导和成纤维诱导，蛋白质印迹法检测两组PDGFRα、脂肪细胞标志物［脂滴包被蛋白和CCAAT/增强子结合蛋白（CCAAT/enhancer binding protein alpha，C/EBPα）］和成纤维细胞标志物［α-平滑肌肌动蛋白（alpha smooth muscle actin，α-SMA）、成纤维细胞特异蛋白1（fibroblast-specific protein 1，FSP-1）］的蛋白表达，并进行半定量分析。油红O染色观察两组Gli1 -MSC双向诱导后的细胞脂肪分化程度，并进行半定量分析。
结果他莫昔芬诱导后，可通过绿色荧光蛋白的表达标记准确地从流式细胞仪中分离出Gli1 -MSC。成脂肪诱导后，实验组PDGFRα蛋白表达（0.017±0.002）显著小于对照组（0.184±0.012）（t=25.48，P=0.002），脂滴包被蛋白（3.138±0.414）和C/EBPα（3.565±0.289）蛋白表达均显著大于对照组（分别为2.312±0.218、2.179±0.103）（t=6.21，P=0.025；t=6.69，P=0.022），即PDGFRα的敲除增强了Gli1 -MSC的成脂肪分化能力。成纤维诱导后，实验组PDGFRα、α-SMA和FSP-1的蛋白表达（分别为0.030±0.001、0.932±0.177和0.276±0.020）均显著小于对照组（分别为0.439±0.006、1.352±0.170和0.835±0.097）（t=149.40，P
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