【摘 要】
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将含有鹅源副粘病毒(NA-1株)F基因的重组质粒PMDF用限制性核酸内切酶Xba I和Sph I双酶切,经琼脂糖凝胶电泳,回收纯化,得到F基因.用Xba I和Sph I将pFastBac I质粒双酶切,回收,将酶切的pFastBac I质粒与F基因用T4DNA连接酶进行粘性末端连接,得到阳性重组质粒PFF.PFF转化大肠杆菌DH10Bac后,F基因在助手质粒(helper plasmid)的帮助下
【机 构】
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吉林大学畜牧兽医学院动物重要病原与疫病研究室 长春市经济技术开发区动物检疫站
【出 处】
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吉林省畜牧兽医学会2005年学术年会
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将含有鹅源副粘病毒(NA-1株)F基因的重组质粒PMDF用限制性核酸内切酶Xba I和Sph I双酶切,经琼脂糖凝胶电泳,回收纯化,得到F基因.用Xba I和Sph I将pFastBac I质粒双酶切,回收,将酶切的pFastBac I质粒与F基因用T4DNA连接酶进行粘性末端连接,得到阳性重组质粒PFF.PFF转化大肠杆菌DH10Bac后,F基因在助手质粒(helper plasmid)的帮助下,通过转座进入Bacmid,构建了重组Bacmid(re-Bacmid).在含有X-gal/IPTG、庆大霉素、卡那霉素和四环素的琼脂平板上,筛选白色菌落后,提取re-Bacmid转染Sf-9昆虫细胞.在昆虫细胞内,re-Bacmid经复制、表达、装配,形成重组杆状病毒,并表达F蛋白.经SDS-PAGE和Weston-blot分析,表达的F蛋白的分子量63kDa,并证明在昆虫细胞内表达的蛋白能部分糖基化.表达的F蛋白约占细胞总蛋白的10％.
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本试验通过测定美国苜蓿王牧草在不同时期的地上营养成分含量和干物质产量,分析了其地上营养成分的动态学变化.提出了美国苜蓿王在长春地区的最佳刈割期.
随机选取健康的成龄育肥牛8头,平均分成2组,一组喂给海藻提取物3g/头·d,一组饲喂正常的基础日粮,饲喂30d,称重并利用外源指示剂法测定两组牛对蛋白质的消化率.对数据进行统计分析,结果表明,试验组平均日增重为1.095kg,对照组平均日增重为0.868kg.,试验组蛋白质利用率比对照组提高19.03％,差异显著,可以推广使用.
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