【摘 要】
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高效液相分析广泛用于样品的纯度分析,但仍存在固定相,流动相和波长等影响测量结果的不确定性因素.本文以芦丁为研究对象,以样品中主成分和3种后杂的分离效果为评价指标,
【机 构】
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大连工业大学食品学院 辽宁大连 116034
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高效液相分析广泛用于样品的纯度分析,但仍存在固定相,流动相和波长等影响测量结果的不确定性因素.本文以芦丁为研究对象,以样品中主成分和3种后杂的分离效果为评价指标,对流动相和波长进行优化,并利用光谱归一化法,吸收光谱差值法和双波长法对主峰纯度进行分析.结果显示乙腈-水为流动相有利于芦丁与后杂的分离.在芦丁最佳吸收波长(λmax ＝256 nm)下的峰面积比(RPA)为96.00％,而在其它5种波长(220,260,300,340,380 nm)下的RPA 的均值为(96.02 ±0.27)％.光谱归一化的不重叠和双波长方法都说明主峰不纯,且吸收光谱差值法更加进一步说明了主峰在12.17 min 后开始出现杂质(色谱峰起始和终止时间为：11.87 min,12.74 min).本试验说明了利用HPLC 测定样品纯度时由流动相和波长的选择所引起结果的不确定性,并在主峰为纯峰且样品符合公式：RPAavg-RSD ≤ RPAλmax ≤RPAavg+RSD(RSD≤1％)时,可以提高HPLC 方法对样品纯度分析的结果合理性,使得结果更加接近于样品的真实纯度.
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