【摘 要】
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缩胆囊素(cholecystokinin,CCK)是一族广泛分布于中枢神经系统的神经肽,它们参与调节各种生理过程,并与焦虑、抑郁等精神疾病相关[1].由于生物体液中 CCK 浓度低,基质复
【机 构】
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武汉大学化学与分子科学学院测试中心,武汉,430072
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缩胆囊素(cholecystokinin,CCK)是一族广泛分布于中枢神经系统的神经肽,它们参与调节各种生理过程,并与焦虑、抑郁等精神疾病相关[1].由于生物体液中 CCK 浓度低,基质复杂,建立高效专一性的 CCK富集方法是进行 HPLC/MS 分析的前提.本研究基于抗原决定簇法的原理,以 CCK 四肽(CCK4)为模板,在枪头中原位合成了可以特异性识别 CCK 的分子印迹聚合物(MIP)整体柱[2].实验结果表明,所制备的 MIP整体柱具有良好的通透性,较高的吸附容量,对混合多肽溶液中的 CCK 神经肽包括 CCK4、五肽 CCK5 和八肽 CCK8 具有特异性的识别富集效果.我们将此 MIP 整体柱应用于人脑脊液的脱盐及 CCK 神经肽的固相微萃取,MALDI-TOF MS 分析结果表明：脑脊液样品经过该 MIP 固相微萃取整体柱处理后,三种 CCK 神经肽的信号强度和分辨率得到显著增加,当加标浓度降低至 1nM 时,仍可以在脑脊液中不受基质干扰地检测到 CCK.该 MIP 固相微萃取整体柱能对脑脊液中多种同源性 CCK 神经肽进行同时分离富集,且具有选择性高、耐用和操作简单的优点.
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