麦二叉蚜唾液蛋白C002的基因克隆与序列分析

来源 :中国植物保护学会第十一次全国会员代表大会暨2013年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunliu168
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  蚜虫唾液蛋白C002在蚜虫取食过程中起到非常重要的作用,但其具体作用机理仍然未知.有研究发现,利用刺吸电位图谱(EPG)检测时,当豌豆蚜唾液蛋白C002基因沉默后,蚜虫取食行为发生明显改变,检测时间内(8h)无取食波出现;C002基因沉默后桃蚜的繁殖率显著下降,但是当桃蚜取食能过量表达C002的本氏烟片后其繁殖率显著上升.以上结果说明,C002参与蚜虫取食过程,并且可能在蚜虫—寄主植株互作关系中起到关键作用.麦二叉蚜(schizaphis graminum)是小麦上的重要害虫,它不仅吸食小麦汁液而且还是小麦黄矮病毒(BYDV)的重要传播媒介.本研究以麦二叉蚜为对象,根据其他蚜虫C002基因序列的保守区域设计简并引物,结合RT-PCR及RACE技术,克隆获得麦二叉蚜唾液蛋白C002的cDNA全长序列,并将其命名为sgC002.sgC002开放阅读框(ORF)为573bp,编码190个氨基酸,预测蛋白分子量为21.8kDa,等电点(PI)为8.17.预测蛋白N端的24个氨基酸为信号肽.氨基酸序列比对结果显示,sgC002与棉蚜、褐色橘蚜C002相似性达到69.1%,未检出其他相似序列.结果显示,仅在麦二叉蚜唾液腺中特异表达;半定量PCR及Real-time PCR(实时荧光定量PCR)结果均显示C002仅在蚜虫唾液腺中特异表达.麦二叉蚜唾液蛋白sgC002基因的克隆,为后续的功能研究打下基础,为深入研究蚜虫—寄主植物互作机理(如虫害诱导的植物防御反应、蚜虫传毒机理)研究提供新的思路.
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