【摘 要】
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目的:本研究从B-ALL细胞系到临床标本,由体外到体内全面的探讨diabody单独以及联合化疗药物阿糖胞苷(AraC)对B-ALL的疗效差异及机制,为B-ALL的临床治疗提供新方案.方法:利用
【机 构】
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中国医学科学院血液病医院血液学研究所 天津 300020
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目的:本研究从B-ALL细胞系到临床标本,由体外到体内全面的探讨diabody单独以及联合化疗药物阿糖胞苷(AraC)对B-ALL的疗效差异及机制,为B-ALL的临床治疗提供新方案.方法:利用非放射性免疫荧光染料Calcein-AM测定diabody单独或联合阿糖胞苷介导T细胞对肿瘤细胞的体外杀伤活性;实时定量PCR检测激活T细胞后穿孔素(Perforin)和颗粒酶B(Granzyme B)的释放;FACS检测Nalm6表面共刺激分子CD80和CD86以及T细胞激活后表面标志CD25和CD69的表达.建立NOD/SCID-Nalm6细胞移植瘤模型,采用外周血T淋巴细胞联合diabody间隔7天尾静脉给药三次,联合Ara-C组每次给药前72小时尾静脉注射Ara-C,根据肿瘤大小计算抑瘤率并评价疗效.以B-ALL病人标本外周血单个核尾静脉接种NOD/SCID小鼠,10-12周后处死小鼠取骨髓用FACS检测人白血病细胞在小鼠骨髓中的植入情况,据此来判断模型的建立是否成功;单独diabody组采用外周血T淋巴细胞联合diabody间隔7天尾静脉给药三次,联合Ara-C组每次给药前72小时尾静脉注射Ara-C,治疗12周后处死小鼠取骨髓用FACS检测人白血病细胞在小鼠骨髓中的浸润情况并评价疗效.结论:Ara-C联合双功能抗体CD3/CD19可以诱导白血病细胞表面的共刺激分子B7表达升高,增强双功能抗体介导的T细胞特异性杀伤肿瘤细胞的作用,这一发现为B-ALL的临床治疗提供了新思路,特别对于清除肿瘤的微小残留灶、转移灶具有良好应用前景.
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