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本文从Rhodococcus erythropolis DSM 43297(ATCC 17896)克隆ADH基因(1047bp )，用LA Taq聚合酶PCR扩增，直接与T载体pMD 19-T Simple Vector连接，构建TA克隆质粒。然后用限制性内切酶EcoR I和Hind III双酶切，目的片段纯化后连接到pET-28a表达载体上，成功构建了重组大肠杆菌E. coliBL21(DE3)/pET 28a-RE ADH。重组的E. coli BL21在LB培养基中经IPTG诱导后30℃，200 rpm继续培养14h收集菌体，提取粗酶液。以苯乙酮为底物，粗酶液的比酶活为127U/mg。经65℃热水浴处理15 min后去除80%的杂蛋白；再经亲和层析和凝胶过滤层析纯化最后获得冻干粉纯度达到90%以上，纯化倍数为8.0。 FDH由本实验室已构建的重组菌生产，将ADH和FDH按1：1比例混合，加入少量的NAD十，可以专一性催化4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原得到手性单体(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯，对映体过量率(e.e.)较高，且FDH催化NADH再生的方式大大减少了成本，工业化应用潜力大大提高。