生物素-亲和素介导以KDR为靶点的脂质体超声造影剂体外靶向实验研究

来源 :1st International Symposium on Ultrasound Molecular Imaging | 被引量 : 0次 | 上传用户:lws8228
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  目的 以与VEGF的主要受体KDR特异性结合的小肽K237为配体研制靶向脂质体超声造影剂并进行体外性能鉴定.方法采用"生物素-亲和素"桥接法构建靶向微泡(P-Bio-Av-Bio-Mbs),将KDR不同程度表达的细胞LOVO、HUVECs和LS174T分别与P-Bio-Av-Bio-Mbs孵育,同时另将荧光标记生物素-亲和素桥接靶向脂质体微泡(FITC-P-Bio-Av-Bio-Mbs)、荧光标记的单纯小肽微泡复合物(FITC-P-Mbs)及荧光标记的普通脂质体微泡(FITC-Mbs)分别与LOVO细胞孵育,光镜及荧光显微镜观察微泡与细胞结合情况及荧光强度;分别以10、50μg的小肽K237预先与LOVO细胞孵育,再将P-Bio-Av-Bio-Mbs与LOVO细胞孵育,观察细胞周围微泡分布.结果KDR强阳性表达的LOVO细胞周围见大量靶向微泡黏附,荧光强度3级,KDR阳性表达的HUVECs周围可见靶向微泡黏附,荧光强度2级,KDR阴性表达的LS174T细胞周围靶向微泡黏附极少,荧光强度0-1级.FITC-P-Bio-Av-Bio-Mbs、FITC-P-Mbs及FITC-Mbs与LOVO细胞结合,黏附微泡荧光强度分别为3级、0-1级、0级.10 μg预处理组黏附靶向微泡明显减少,50μg封闭组靶细胞周围无靶向微泡黏附.结论以KDR为靶点携小肽K237的靶向脂质体超声造影剂通过生物素-亲和素桥介导成功制备,在体外能与靶细胞高效特异结合.针对KDR为靶点进行肿瘤新生血管分子靶向显像可能为肿瘤早期诊断提供新的思路.
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