猪腹泻病毒多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

来源 :中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cpts
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根据GenBank中猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(Porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)和猪轮状病毒(Porcine rotavirus,RV)3种病毒基因序列,设计合成引物,建立RT-PCR检测方法.用这3对引物对同一样品中的PEDV、TGEV、RV核酸模板进行多重RT-PCR扩增,结果显示:可同时扩增PEDV的682 bp,TGEV的480bp和RV的297 bp的特异性片段,而对其他2种病原的PCR扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该多重RT-PCR技术能检出2.37 ng的PEDV、9.66 ng的TGEV和7.78 ng的RV模板.用20份临床病料对本研究多重RT-PCR技术和单项RT-PCR技术进行对比验证,结果显示:两者的总符合率为100%.结果表明:建立的多重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断.
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