小麦抗白粉病相关基因TaRPM1的克隆及功能验证

来源 :第六届全国小麦基因组学及分子育种大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:slippers3000
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  从分子生物学角度发掘小麦抗白粉病基因并对其功能进行研究已成为小麦育种工作中的一项重要任务.实验室前期工作中已获得抗病基因片段F22,本研究在此基础上设计引物,利用RACE技术进一步从抗病小麦Brock中克隆到一个小麦抗白粉病相关基因,经Blast比对发现其分别与RPM1基因高度同源,故定名为TaRPM1.该基因全长2934bp,共编码977个氨基酸,预计分子量114.6kDa,等电点6.20.经Blast比对,发现与二穗短柄草RPM1基因序列高度同源且具有同样的结构.利用半定量RT-PCR的方法对TaRPM1基因在不同品种小麦及小麦接种白粉菌不同的时间段之后的表达情况进行了分析,结果发现,TaRPM1基因在抗病小麦Brock、NILS中表达水平较高,尤其是Brock中,除染菌后4hr,其余时间一直维持很高水平的表达.相反,在感病小麦京411中,TaRPM1基因的表达水平很低.随后使用病毒诱导的基因沉默技术对抗病小麦Brock中的TaRPM1基因进行沉默实验,以验证该基因的功能.结果表明,沉默TaRPM1基因后,抗病小麦Brock上的白粉菌孢子的成功侵染比例明显增高,白粉菌附着胞畸形率显著下降,甚至在接种7d后,可用肉眼观察到叶片上存在大量乳白色菌斑.这说明了在抗病小麦Brock中沉默TaRPM1基因可以显著降低植株对白粉菌的抗病水平,故推测,TaRPM1基因很可能参与小麦对白粉菌的抗性反应进程,进一步研究正在进行中.
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