快速检测血浆中儿茶酚胺类物质的LC-MSMS方法

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1)研究意义:儿茶酚胺类化合物在临床上可以用于辅助诊断高血压、甲亢、嗜铬细胞瘤、神经母细胞瘤等内分泌相关的疾病。儿茶酚胺(包括多巴胺、肾上腺素和去甲肾上腺素)及其代谢物(变肾上腺素、去甲变肾上腺素和3-甲氧基酪胺)在血浆中的浓度变化与许多病理过程息息相关,含量超标会引发高血压与心肌梗塞,含量过低会导致低血压。但是儿茶酚胺及其代谢物的极性较大、结构相近,而且在血浆中含量较低、干扰较大,传统的免疫法不能准确定量,必须采用先进的样品前处理方法和灵敏度更高、选择性更好的液相色谱串联质谱法进行定量分析。2)研究方法:本研究采用Waters Oasis WCXμElution 96孔固相萃取柱净化富集血浆中儿茶酚胺及其代谢物,色谱分离用HSS PFP色谱柱(2.1×100 mm,1.7μm),采用Waters UPLC I-Class Xevo TQ-S IVD超高灵敏度的三重四极杆质谱通过MRM进行定量分析。3)实验结果:优化后的样品前处理方法简便、快速,1小时内即可完成96个样品的前处理,然后直接进样,不需要吹干和复溶。每个样品色谱分离时间仅4 min,每天可以检测200例以上的样品。3个儿茶酚胺原型的检测限可以达到10 pg/mL,线性范围是10-2000 pg/mL,3个儿茶酚胺原型的检测限可以达到1pg/mL,线性范围是2-2000 pg/mL。4)主要结论:本文采用液相色谱串联质谱建立了血浆样品中儿茶酚胺及其代谢物的快速、简便、高灵敏度的定量分析方法。前处理操作简便快速,可以满足临床大批量样品的检测要求。对嗜铬细胞瘤、神经母细胞瘤等内分泌相关的疾病的筛查诊断具有重要意义。
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