【摘 要】
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目的:通过化学合成方法合成新型硫化氢(H2S)供体化合物,建立动脉粥样硬化(AS)细胞模型,探讨新型H2S供体是否能够保护氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮损伤.方法:采用酯缩合等化学合成方法,将原料药烟酸与茴三硫合成H2S供体,应用MS、NMR对化合物的结构进行鉴别;利用微孔滤膜吸附法对新合成的化合物进行H2S释放检测;用浓度为80μg/mL ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞(HUV
【机 构】
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川北医学院药学院,川北医学院药物研究所
【出 处】
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中国药理学会麻醉药理专业委员会第七次全国学术年会暨甘肃省医师协会麻醉医师分会成立大会
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目的:通过化学合成方法合成新型硫化氢(H2S)供体化合物,建立动脉粥样硬化(AS)细胞模型,探讨新型H2S供体是否能够保护氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮损伤.方法:采用酯缩合等化学合成方法,将原料药烟酸与茴三硫合成H2S供体,应用MS、NMR对化合物的结构进行鉴别;利用微孔滤膜吸附法对新合成的化合物进行H2S释放检测;用浓度为80μg/mL ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)建立AS细胞模型,并对其生物特性进行鉴别.采用EUSA方法检测不同阶段细胞内总胆固醇(TC)和游离胆固醇(Fch)含量,Fch占TC含量的50%,则表明造模成功;透射电镜和油红O染色观察不同阶段细胞内脂质的活性变化规律.应用浓度为200μM/L的新型H2S供体作用于此细胞模型,设置对照组(NaSH、茴三硫、烟酸)和空白组,通过CCK8法检测细胞增殖活力.结果:经化学合成所得产物通过MS和NMR的检测,表明化合物合成成功;微孔滤膜法H2S检测结果表明新合成化合物在200μM/L时,H2S释放量最大;ox-LDL诱导12h开始,HUVEC细胞内出现大量红染颗粒,游离胆固醇和总胆固醇均比对照组增加,细胞游离胆固醇含量大于总胆固醇的50%,AS细胞模型建立成功.新型H2S供体作用于AS细胞模型6h后,细胞增殖活力相比无H2S供体组有明显的提高.结论:利用ox-LDL诱导HUVEC细胞12h-72h后,细胞形态以及Fch/TC的比值符合AS细胞模型的生物学特征,表明成功的建立了AS细胞模型.CCK8法细胞增殖活力的检测证明了新型H2S供体对ox-LDL诱导的血管内皮损伤具有一定的保护作用,为H2S供体型药物的研发与临床治疗提供有价值的参考.
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