【摘 要】
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[目的]在研究发现对乙酰氨基酚(AAP)和乙酰半胱氨酸(NAC)单用或联合使用都能抑制TLR4-NF-κB信号通路从而缓解仔猪的免疫应激性炎症的基础上,进一步研究了AAP和NAC对LPS诱导的仔猪外周血单核细胞NLRP3炎性小体信号通路的作用及机制.[方法]将分离后培养的仔猪外周血单核细胞分别设空白对照组、脂多糖(LPS)造模组、对乙酰氨基酚组(浓度为0.25、0.5和1mM)、乙酰半胱氨酸组(浓
【机 构】
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武汉轻工大学动物科学与营养工程学院,湖北武汉430023
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨
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[目的]在研究发现对乙酰氨基酚(AAP)和乙酰半胱氨酸(NAC)单用或联合使用都能抑制TLR4-NF-κB信号通路从而缓解仔猪的免疫应激性炎症的基础上,进一步研究了AAP和NAC对LPS诱导的仔猪外周血单核细胞NLRP3炎性小体信号通路的作用及机制.[方法]将分离后培养的仔猪外周血单核细胞分别设空白对照组、脂多糖(LPS)造模组、对乙酰氨基酚组(浓度为0.25、0.5和1mM)、乙酰半胱氨酸组(浓度为0.25、0.5和1mM)和用药联合组(浓度均为0.25、0.5和1mM组合),药物预处理1h后,再加入终浓度为1μg/mL的LPS,继续培养10、16和20h后,采用ELISA法测定细胞培养上清液中IL-1β、IL-18和TNF-α的含量；采用Western blot方法测定LPS刺激10h后的单核细胞中Cleaved Casapse-1的含量；采用RT-PCR方法测定LPS刺激3h后的单核细胞中IL-1β,IL-18,NLRP3及Cleaved Caspase-1的mRNA表达量.[结果]LPS刺激后,细胞培养液中IL-1β、IL-18和TNF-α水平均极显著上升(P＜0.01),IL-1β,IL-18,NLRP3及Cleaved Caspase-1的mRNA表达量极显著增加(p＜0.01).LPS刺激不影响NLRP3炎性复合体组成部分ASC和Caspase-1的mRNA水平.AAP(0.5-1.0mM)和NAC(0.5-1.0mM)单独使用或联合使用均能下调IL-1β,IL-18,NLRP3及Cleaved Caspase-1的mRNA表达水平.NAC可显著增强AAP的上述抑制作用.AAP和NAC的联合使用对NLRP3炎性小体信号通路有较好的抑制作用.AAP和NAC的联合抗炎效应发生在NLRP3受体和Cleaved Caspase-1的mRNA表达上调.[结论]对乙酰氨基酚与乙酰半胱氨酸能通过抑制炎性小体信号通路的激活,减轻脂多糖诱导的仔猪单核细胞的炎症反应,且两药联用后的效果更佳,AAP和NAC的抗炎活性可能与LPS诱导下的NLRP3炎性小体信号通路的抑制有关.
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