马立克氏病病毒vIL8启动子的克隆及其转录活性

来源 :2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangl3255
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马立克氏病病毒(MDV)编码一种病毒性趋化因子——类白细胞介素8(vIL8),其在致病致瘤中的作用尚不完全明了。本研究通过PCR方法克隆了vIL8 5’端潜在的启动子片段,构建不同长度的vIL8启动子控制下的pGL3-LUC表达载体,转染鸡胚成纤维细胞(CEF)、鸡胚法氏囊细胞(CEB),并利用荧光素酶检测系统检测启动子的活性,分析病毒对vIL8的调控作用。结果表明:本研究成功克隆出vIL8启动子(-1362~+81)片段,并通过PCR方法克隆出不同大小片段(-1336~+10,-1094~+10,-882~+10,-630~+10,-470~+10,-176~+10)的调控序列,成功构建了6个pGL3/vIL8启动子报告基因表达载体;重组表达载体转染实验表明,vIL8启动子在CEF和CEB中均有活性,但在两种细胞中启动子活性有所差异,-470~+10片段在CEB中相对活性达23.2,但在CEF中相对活性近于0,提示在-470~-176区域存在淋巴组织特异性的转录调节元件结合区,vIL8基因的启动子具有淋巴组织特异性。这为深入研究vIL8转录表达的调控机制进而揭示vIL8在MDV致病致瘤中的功能提供了理论依据。
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