EGCG增强硼替佐米在原代肝细胞中对HBsAg的抑制作用

来源 :2012年全国有毒中药的研究及其合理应用交流研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a13456400000
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目的:研究EGCG及其联合硼替佐米对HBV转基因小鼠原代肝细胞的抗HBV作用及机制.方法:采用改良的两步灌流法分离HBV转基因小鼠原代肝细胞;MTT法分别检测不同浓度的EGCG以及不同浓度的EGCG联合1μmol·L-1硼替佐米对HBV转基因小鼠原代肝细胞的细胞毒性;药物作用24h后,分别应用ELISA法和荧光定量PCR法测定细胞培养上清中HBsAg和HBV-DNA含量;采用Western blot法检测不同浓度EGCG和不同作用时间下细胞Hsp90的表达情况.结果:250μmo1·L-1及以下浓度的EGCG对细胞均无毒性作用,250μmol·L-1及以下浓度EGCG联合1μmol·L-1硼替佐米对细胞无明显毒性作用; 50μmol·L-1~250μmol·L-1EGCG单独作用时,对HBsAg和HBV-DNA具有显著性的抑制作用(P<0.05);当250μmol·L-1的EGCG联合1μmol·L-1硼替佐米时,对HBsAg和HBV-DNA抑制作用明显强于EGCG或者硼替佐米单药作用(P<0.05);EGCG可以抑制细胞Hsp90的表达,并且抑制作用随药物浓度的增加和作用时间的延长而增强.结论:EGCG可以抑制转基因小鼠原代肝细胞HBV的复制,与1μmol·L-1硼替佐米联用时对HBV具有协同抑制作用.
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