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目的 观察DNA甲基化抑制剂对苯代谢苯酚和氢醌抑制K562细胞红系分化的干预作用,以及经苯酚和氢醌处理K562细胞的红系相关基因甲基化水平变化.方法 K562细胞经苯酚或氢醌处理24 h后,加入DNA甲基化抑制剂5-aza-CdR共同作用48 h,洗去药物后用氯化高铁血红素诱导48 h后,用联苯胺染色法和反转录PCR分析细胞的血红蛋白阳性率和红系相关基因(包括α-,β-和γ-珠蛋白、血红素合成相关酶PBGD和ALAS2以及转录因子GATA-1)的mRNA表达水平；此外,K562经苯酚或氢醌处理72 h后,应用Sequenom MassARRAY分析技术定量分析红系相关基因的甲基化水平.结果 K562细胞未经氯化高铁血红素诱导的血红蛋白阳性率低于1％,经氯化高铁血红素诱导的血红蛋白阳性率升高到40％,红系相关基因mRNA表达也在诱导后显著提高；K562细胞经苯酚800 μmol·L-1或氢醌40 μmol·L-1处理72 h再经氯化高铁血红素诱导的血红蛋白阳性率分别下降到31.60％和29.37％,红系相关基因mRNA表达均显著低于对照组；而K562细胞经苯酚或氢醌处理的后48 h加入5-aza-CdR共同作用后经氯化高铁血红素诱导的血红蛋白阳性率均恢复到对照水平,5-aza-CdR同样完全阻止了苯酚或氢醌抑制红系相关基因mRNA表达.K562经苯酚800 μmol· L-1处理72 h后,α-珠蛋白基因的启动子和外显子1区域有4个CpG分析单位(即-455与-450 CpG位点,-344,-339,-336与-332位点,-256与-253位点,+159与+154位点)的甲基化水平显著升高,α(-珠蛋白远端调控序列HS40的2个CpG位点的甲基化水平也有显著升高；β-珠蛋白基因启动子-414 CpG位点的甲基化水平显著提高,但γ-珠蛋白基因启动子甲基化水平没有明显变化,β-珠蛋白簇远端调控区HS-1的2个CpG位点和HS-4的1个CpG位点甲基化水平均显著升高,而HS-2和HS-3甲基化水平没有明显变化；PBGD基因外显子1的+47 CpG位点和GATA-1启动子-122 CpG位点甲基化水平显著提高.K562经氢醌40 μmol·L-1处理72 h后,α-珠蛋白基因的启动子和外显子1区域甲基化水平没有明显变化,不过HS40的2个CpG位点的甲基化水平显著升高；β-珠蛋白基因启动子-125 CpG位点的甲基化水平显著降低,而γ-珠蛋白基因启动子、HS-1和HS-2甲基化水平没有明显变化,但HS-3和HS-4各有1个CpG位点甲基化水平显著升高；PBGD基因外显子1的甲基化水平没有明显变化,但GATA-1启动子-222 CpG位点甲基化水平显著提高.结论 甲基化抑制剂可有效阻止苯酚和氢醌抑制红系分化,苯酚和氢醌还可引起红系相关基因某些CpG位点甲基化水平的变化,提示DNA甲基化在苯酚和氢醌抑制红系分化中扮演重要角色.