【摘 要】
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目的：(1)研究脂多糖(LPS)在小鼠成牙本质样细胞系(OLCs)矿化过程中的作用.(2)探讨LPS调控OLCs矿化过程中可能的作用机制.方法：通过茜素红染色、定量分析和实时定量PCR检测L
【机 构】
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第四军医大学口腔医学院牙体牙髓病科军事口腔医学国家重点实验室
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目的：(1)研究脂多糖(LPS)在小鼠成牙本质样细胞系(OLCs)矿化过程中的作用.(2)探讨LPS调控OLCs矿化过程中可能的作用机制.方法：通过茜素红染色、定量分析和实时定量PCR检测LPS对OLCs矿化结节形成和几种牙本质基质蛋白mRNA水平表达的影响.为了进一步探索相关的分子机制,对细胞分别进行LPS和不同的信号通路抑制剂处理14天,然后通过茜素红染色、定量分析检测矿化结节形成情况,通过实时定量PCR检测牙本质基质蛋白的表达变化.另外,LPS刺激诱导的相关胞内信号蛋白磷酸化活化水平由western blot检测.结果：不同浓度LPS刺激OLCs,茜苏红染色和定量结果显示1μg/ml LPS显著的抑制OLCs的矿化能力,0.01和0.1μg/ml与对照组相比无明显变化.牙本质基质蛋白在1μg/mlLPS分别刺激3,7,14天mRNA表达水平也均有明显的降低.另外,分别通过TLR4抑制剂(CLI-095),ERK抑制剂(U0126),(PI3K)/Akt抑制剂(LY294002)阻断相应的信号通路后,我们发现它们显著的抑制了LPS调控的OLCs的矿化作用.然而,p38 MAPK,JNK,NF-κB信号通路抑制剂(SB203580,SP600125,PDTC/BAY 11-7082)并未发挥显著的作用.同时,LPS刺激可导致ERK和PI3K/AKT的磷酸化水平增加,而这一作用可被其特异性的抑制剂阻断.结论：(1)该研究显示LPS可以抑制OLCs的矿化过程.(2)LPS抑制OLCs的矿化过程主要是由TLR4,ERK MAPK和PI3K/AKT信号通路调控的.
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