【摘 要】
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目的：研究线粒体通透性转换孔(mPTP)在硫酸铍(BeSO4)致体外培养人胚肺成纤维细胞凋亡中的作用,并观察mPTP开放抑制剂环孢霉素A(CsA)与促开放剂苍术苷(ATR)对此作用的干预.方法：体外培养人胚肺成纤维细胞(MRC-5),采用CCK-8法确定CsA和ATR干预剂量；试验分空白对照组、BeSO4染毒组(剂量分别为1、10、100 μM)、干预组(10 μM CsA+10 μM BeSO4
【机 构】
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宁夏医科大学公共卫生与管理学院,银川 750004
【出 处】
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第六届中国毒理学会免疫毒理专业委员会换届及学术会议
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目的：研究线粒体通透性转换孔(mPTP)在硫酸铍(BeSO4)致体外培养人胚肺成纤维细胞凋亡中的作用,并观察mPTP开放抑制剂环孢霉素A(CsA)与促开放剂苍术苷(ATR)对此作用的干预.方法：体外培养人胚肺成纤维细胞(MRC-5),采用CCK-8法确定CsA和ATR干预剂量；试验分空白对照组、BeSO4染毒组(剂量分别为1、10、100 μM)、干预组(10 μM CsA+10 μM BeSO4和10 μM ATR+10 μM BeSO4)、干预对照组(10 μMCsA和10 μMATR)；体外培养24h、48h、72h,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,qRT-PCR检测AIF mRNA表达,Western Blot检测各剂量组AIF蛋白表达水平.结果：(1)染毒24h、48h、72h,CCK-8法确定CsA和ATR干预剂量均为10μM.(2)低、中、高剂量BeSO4染毒细胞24h、48h、72h,细胞凋亡率均低于同时相空白对照组(P＜0.05)；CsA干预48h、72h,细胞凋亡率明显低于同时相空白对照组(P＜0.05)；ATR干预24h、48h、72h,细胞凋亡率明显高于10μM BeSO4染毒组(P＜0.05).(3)低、中、高剂量BeSO4染毒24h、48h、72h,AIF的mRNA表达水平均低于同时相空白对照组(P＜0.05)；CsA干预24h、48h、72h,AIF mRNA表达明显低于同时相空白对照组(P＜0.05)；ATR干预24h、72h,AIF mRNA表达与同时相空白对照组相比有统计学意义(P＜ 0.05).(4)低、中、高剂量BeSO4染毒细胞48h,AIF蛋白的表达水平低于同时相空白对照组(P＜ 0.05)；CsA干预48h,AIF蛋白表达量低于同时相空白对照组(P＜0.05)；ATR干预72h,AIF蛋白表达量高于同时相10μM BeSO4染毒组(P＜0.05).结论：BeSO4可抑制人胚肺成纤维细胞凋亡；线粒体通透性转换孔在BeSO4致人胚肺成纤维细胞凋亡中发挥了一定的作用；经CsA与ATR干预进一步验证了线粒体通透性转换孔的作用.
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