【摘 要】
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新型环形病毒AGV2最早于201 1年报道.为建立AGV2血清学诊断方法,并探究其vp3基因功能,本研究对AGV2的vp3基因进行了克隆、表达及多抗制备.通过将AGV2 vp3基因克隆进pGEX-6p-1原核表达载体,获得了可溶性GST-VP3融合原核表达产物,并利用纯化的GST-VP3蛋白制备了抗GST-VP3的小鼠多克隆抗体.同时构建获得了pcDNA3.1-VP3以及EGFP-VP3两个AGV
【机 构】
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禽类预防医学教育部重点实验室江苏省动物预防医学重点实验室扬州大学兽医学院 江苏,扬州,225009;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 江苏,扬州,225009
【出 处】
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2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微
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新型环形病毒AGV2最早于201 1年报道.为建立AGV2血清学诊断方法,并探究其vp3基因功能,本研究对AGV2的vp3基因进行了克隆、表达及多抗制备.通过将AGV2 vp3基因克隆进pGEX-6p-1原核表达载体,获得了可溶性GST-VP3融合原核表达产物,并利用纯化的GST-VP3蛋白制备了抗GST-VP3的小鼠多克隆抗体.同时构建获得了pcDNA3.1-VP3以及EGFP-VP3两个AGV2 vp3基因真核表达载体.间接免疫荧光以及EGFP观察发现,AGV2的VP3蛋白及其EGFP融合蛋白EGFP-VP3在HCT116肿瘤细胞中的表达集中于细胞核,且呈散在点状分布,类似凋亡小体.这些AGV2 VP3表达载体的构建,表达产物、小鼠多克隆抗体的获得及其在肿瘤细胞中的表达分布,为进一步研制AGV2血清学诊断方法提供了材料,为深入探究AGV2 VP3的生物学功能打下了基础.
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