【摘 要】
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疱疹病毒UL15蛋白作为末端酶复合物的亚基成员之一,具有水解ATP和特异性切割基因组末端的功能,在病毒基因组的剪切和包装过程中发挥着关键作用.研究发现,在感染疱疹病毒的细胞中,UL15蛋白需定位在细胞核中才能发挥它的作用.在感染鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)的细胞中虽然UL15蛋白最终定位于细胞核,但是UL15蛋白不具有引导蛋白入核的核定位信号序列(Nuclear loca
【机 构】
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四川农业大学预防兽医研究所,四川成都611130;四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心,四川成都611130;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川成都611130
【出 处】
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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议
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疱疹病毒UL15蛋白作为末端酶复合物的亚基成员之一,具有水解ATP和特异性切割基因组末端的功能,在病毒基因组的剪切和包装过程中发挥着关键作用.研究发现,在感染疱疹病毒的细胞中,UL15蛋白需定位在细胞核中才能发挥它的作用.在感染鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)的细胞中虽然UL15蛋白最终定位于细胞核,但是UL15蛋白不具有引导蛋白入核的核定位信号序列(Nuclear location sig-nal,NLS),在缺乏病毒其它蛋白时不能单独进入细胞核,目前其入核机制尚不明确.本研究将UL15基因和可能与UL15蛋白存在相互作用的UL6、UL28、UL33基因分别连接至真核表达载体,构建重组表达质粒UL15-pcDNA3.1、UL6-pCMV-C-Flag、UL28-pCMV-HA、UL33-pCMV-myc.将 UL15与 UL6、UL28、UL33的真核表达质粒进行单独转染或共转染,通过间接免疫荧光检测UL15蛋白在细胞中的定位.结果发现,UL15真核表达质粒单独转染时其仅分布于细胞质中,在UL15与UL6的真核表达质粒共转染时,UL15蛋白有部分入核现象,UL15分别与UL28、UL33真核表达质粒共转染时,UL15蛋白仍然只停留在细胞质中.但是,当UL15与UL28、UL33三者共转染时,UL15蛋白则能够完全进入细胞核,而当UL15与UL28和UL6共转染或者与UL33和UL6共转染时,UL15蛋白仍然只有部分入核.可初步认为,在感染DPV的细胞中,UL15蛋白入核是在UL15与UL28和UL33蛋白形成复合物后,由UL28和UL33蛋白共同携带UL15蛋白进入细胞核.UL6蛋白在UL15蛋白的入核过程中起着一定的促进作用.
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