七氟醚后处理通过NOS下调凋亡减轻离体大鼠心肌缺血再灌注损伤

来源 :中国长江医学论坛——2015麻醉学年会暨江苏省第二十次麻醉学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tianhaiyandml
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  目的:评价七氟醚后处理对大鼠缺血再灌注心肌NOS/NO、NAD+含量,及对Caspase3和Bcl-2蛋白含量变化的影响,探讨七氟醚后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用机制.方法:雄性SD大鼠72只,随机将其分为6组(n=12):假手术组(S组):连续用K-H液灌注180 min;七氟醚组(Sev组):K-H液灌注60 min后,用含2.5%七氟醚的K-H液灌注15 min,再用K-H液灌注105 min;缺血再灌注组(I/R组):K-H液灌注30 min后,停灌30 min,再灌注120min;七氟醚后处理组(SP组):K-H液灌注30 min后,停灌30 min,于再灌注开始即刻用含2.5%七氟醚的K-H液灌注15 min,余同;七氟醚后处理+NOS抑制剂旋硝基精氨酸甲基酯(L-NAME)组(SPL组):再灌注开始用含浓度为100 μmol/L L-NAME的K-H液灌注60 min(再灌注开始同时注入K-H液2.5%七氟醚并维持15分钟),随后再K-H液灌注60 min;L-NAME组(L组):再灌注开始即刻用含浓度为100 μmol/LL-NAME的K-H液灌注60 min,再换用上述单纯K-H液灌注60 min;于再灌注2h时取心肌组织,采用分光光度法检测NO、NAD+含量和NOS活性,分光光度法检测NO、NOS、NAD+含量;Western Blot法测定各组Caspase3和Bcl-2蛋白表达;TTC法测定心肌梗死范围;透射电镜观察心肌超微结构.结果:与I/R组比较,SP组NO、NAD+含量和NOS活性升高,Caspase3蛋白含量下降、Bcl-2蛋白含量升高,心肌梗死范围缩小(P<0.05).与SP组比较,SPL组NO、NAD+含量和NOS活性下降;Caspase3蛋白含量上升、Bcl-2蛋白含量下降,心肌梗死范围扩大(P<0.05).透射电镜观察:SHAM组:肌丝结构排列清晰,线粒体结构完整、嵴排列整齐;I/R组:肌丝排列紊乱,线粒体肿胀,嵴明显减少,形成电子透亮区,空泡样变性;SP组:肌丝结构基本完整,排列欠清晰,线粒体轻度肿胀,少数空泡样变性.结论:七氟醚后处理可通过上调心肌NOS活性,增加NO产量,减少MPTP开放,从而抑制凋亡,减少心肌梗死面积,减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.
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