金黄色葡萄球菌生物被膜形成及其相关调控基因研究

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【研究目的】通过对金黄色葡萄球菌(简称金葡菌,Staphylococcus aureus,S.aureus)生物被膜形成条件和调控机制的研究,为进一步从S.aureus生物被膜角度开展由S.aureus导致的奶牛乳腺炎病的防控提供了新思路。【材料方法】S.aureus(CVCC1882)由中国兽药监察所提供。本研究通过建立S.aureus体外生物被膜模型,利用刚果红鉴定、结晶紫定量检测、共聚焦激光显微镜(CLSM)观察生物被膜的形态结构;同时利用PCR检测生物被膜相关调控基因的表达。【结果】刚果红鉴定S.aureus可以产生多糖黏附素(PIA);结晶紫定量检测S.aureus生物被膜随着培养时间的延长,生物被膜逐渐成熟,在12 h左右开始粘附载体表面,24 h之后达到成熟期;ica A、ica D、ica B、ica C及agr基因在S.aureus生物被膜形成过程中均有表达。【讨论】S.aureus生物被膜分三个阶段形成,早期大量细菌集聚在一起,逐渐粘附于载体表面;接着分泌大量的PIA,由ica操纵子调控ica A、ica D、ica B、ica C基因表达;而agr基因在成熟期起着关键性作用,调控生物被膜的成熟及分离。所以在根本上解决生物被膜感染问题,只要在关键阶段研发对基因调控起到抑制作用的抗菌制剂,就可以控制生物被膜的形成。
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