【摘 要】
：
本研究根据禽流感病毒核蛋白基因序列,设计合成一对引物,采用RT-PCR法成功地克隆了AIV NP基因.经测序证实NP全序列长1542bp,编码499个氨酸,与其它已发表的同亚型AIV的NP基因
【机 构】
：
华中农业大学畜牧兽医学院(湖北武汉)
【出 处】
：
中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会
论文部分内容阅读
本研究根据禽流感病毒核蛋白基因序列,设计合成一对引物,采用RT-PCR法成功地克隆了AIV NP基因.经测序证实NP全序列长1542bp,编码499个氨酸,与其它已发表的同亚型AIV的NP基因比较,同源性达97％以上;与不同亚型比较,同源性达92％左右,说明该基因具有高度保守性.将获得的NP基因定向克隆到GST融合原核表达载体pGEX-KG中,并转化入BL21codon plus受体菌中,在IPGT的诱导下获得高效表达.经SDS-PAGE和Western-blotting鉴定分析,融合表达蛋白GST-NP大小约为84KDa,约占菌体总蛋白的18％,能与鸡抗AIV抗体发生明显的抗原抗体反应.AIV-NP基因的克隆和表达,为开发新型广谱基因工程疫苗和临床快速诊断试剂的研制奠定了基础.
其他文献
本试验测定了伪狂犬病病毒Fa株三基因缺失株(SA215)在鸡胚成纤维细胞上连续传代15代次,在非免疫仔猪体内连续传代5代次后,病毒毒价及对易感动物的安全性变化.并以核酸杂交、
本研究以乙型脑炎病毒SA14-14-2株基因组RNA为模板,采用RT-PCR一步法扩增prM/E基因的全长cDNA(约2kb),将其克隆至pMD18-T载体,获得了克隆质粒pTprME,并对其进行了测序.序列分
<正>授课对象:高中二年级学生本堂课是笔者参加福建省三明市第二中学市级公开周活动上的一堂公开课。因教学效果较好,本堂课获得了与会专家及教师的一致好评。一、教学内容分
本研究针对EHEC O:H的stx基因通过PCR扩增出缺失了183bp的stx基因片段,将其克隆到自杀性载体pCVD442中,然后通过接合性转导将重组自杀性质粒pCVD442::△stx从SM10pir转到O:H
本文对东亚夏季风研究的历史与成就进行了简要的回顾与评述,指出东亚季风的研究是国家经济建设的需求;是学科发展的迫切需求;是国际大气科学领域研究的前沿科学问题之一.提出
东亚地区季风活动不仅受热带季风的作用,而且还受副热带季风的影响,这两种不同性质的季风也是既有联系也有相互独立的.本文就从热带季风和副热带季风的联系和区别着手,对东亚
本文利用1900~2001年的SLP、降水长序列观测资料及NCEP/NCAR再分析资料,研究了华北夏季降水、东亚夏季风的年代际变化特征,并探讨了二者在年代际尺度上的关系.研究结果表明:(
本文通过细胞培养和间接荧光抗体试验的方法从我国不同地区发生肿瘤的病料中同时进行马立克病病毒(MDV)和禽网状内皮增生症病毒(REV)的分离和鉴定.在分离到的13份MDV中,有4株
本文首先定义了副高的东西指数和南北指数,用来描述副高在东西方向和南北方向上的年际变动,并根据东西指数和南北指数的年际变化对环流和降水进行了合成分析.
采用5FullRACE技术及RT=PCR方法,分段设计引物,成功扩增出包含猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株HB-2(sh)/2002全基因组的所有cDNA片段,分别克隆到pGEM-TEasy质粒载体,经序列测定