【摘 要】
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目的：为了研究实验用巴马小型猪SLA-DRB1基因的分子特征,为实验用巴马小型猪SLA单倍型猪群的建立奠定基础.
方法：采集20头(7♂,13♀)小型猪的抗凝血,分离外周血淋巴细胞,提
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨150001
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目的：为了研究实验用巴马小型猪SLA-DRB1基因的分子特征,为实验用巴马小型猪SLA单倍型猪群的建立奠定基础.
方法：采集20头(7♂,13♀)小型猪的抗凝血,分离外周血淋巴细胞,提取RNA,RT-PCR扩增SLA-DRB1基因,结合克隆测序和直接测序结果,获得DRB1等位基因序列,根据其序列特征设计序列特异性引物,建立PCR-SSP方法验证等位基因,并利用软件分析其分子特征.
结果：成功获得了6个DRB1等位基因,其中2个为新发现等位基因,PCR-SSP方法验证结果显示,扩增获得了预期的目的片段;序列遗传多态性分析发现,大部分变异位点集中在β1结构域,氨基酸非同义突变数明显高于同义突变数,且MHCⅢ类分子与外源性抗原结合的16个氨基酸中,仅有1个氨基酸具有保守性;同源比对分析发现,巴马小型猪与人具有较高的同源性,且具有较高的受体-配体结合亲和力.
结论：本研究成功鉴定了6个DRB1等位基因,并分析了其分子特征,新等位基因的识别对巴马小型猪发展为经典实验动物和生物医学模型具有至关重要的作用.
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