梅花鹿生茸区骨膜干细胞cDNA表达文库的构建

来源 :首届中国鹿业发展大会暨中国畜牧业协会鹿业分会成立大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lzh8608
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本研究提取鹿生茸区骨膜干细胞RNA,进而纯化mRNA,利用Oligo(dT)引物反转录合成双链eDNA,然后在其两端加EcoR Ⅰ/HindⅢ定向接头并酶切,将eDNA分子定向连接到具有EcoR Ⅰ/HindⅢ粘性末端的λSCREEN载体中,经过柱分级分离后,体外包装成初级文库,进行文库库容量测定和扩增,初级文库库容量约为1.5×106pfu/毫升.PCR检测cDNA文库的质量表明,插入片段均分布在300bp以上.因此,在鹿茸的研究史上成功地构建了梅花鹿鹿生茸区骨膜干细胞的cDNA文库,为进一步开展鹿茸发育的分子生物学研究奠定了基础.
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