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目的 通过制备一种携带抗血管内皮生长因子受体2 (VEGFR2)单抗靶向超声微泡造影剂,研究其与人胰腺癌细胞的体外黏附能力,同时建立裸鼠移植瘤模型进行超声造影显像,探讨以VEGFR2作为靶点进行胰腺癌新生血管超声分子显像的可行性.方法 采用生物素-链亲和素桥连技术制备携抗VEGFR2单抗的靶向超声微泡,应用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的链亲和素与生物素化脂质微泡反应,于荧光显微镜下观察生物素化脂质微泡的荧光效果；应用罗丹明标记的二抗与靶向微泡反应,观察靶向微泡的荧光效果.制作人胰腺癌CF-PAC1细胞株和PANC01细胞株细胞爬片,通过细胞免疫荧光和Western印迹法检测细胞表面VEGFR2受体的表达水平,将靶向微泡与人胰腺癌CF-PAC1和PANC01细胞分别孵育,洗涤后观察并分析靶向微泡和两种细胞的结合效果和黏附率,同时与非靶向微泡进行对比；建立裸鼠移植瘤模型,随机注射靶向VEGFR2超声微泡或普通微泡,应用Acuson S2000超声仪器进行裸鼠肿瘤超声造影；取出裸鼠肿瘤组织和瘤周正常组织,行苏木精-伊红(HE)染色和免疫组织化学检查,分析组织内VEGFR2表达情况.结果 普通SonoVue微泡、生物素化脂质微泡和靶向微泡外观均呈乳白色,3种微泡的平均粒径分别为(2.47±0.29)、(2.44±0.23)、(2.59±0.26) μm.抗VEGFR2单抗的靶向微泡与大鼠IgG孵育后,靶向微泡外壳发出明亮的红色荧光,表明成功制备了抗VEGFR2靶向微泡.免疫荧光和Western印迹法检测显示,人胰腺癌CF-PAC1和PANC01细胞中VEGFR2均呈阳性表达；体外寻靶试验结果显示,抗VEGFR2靶向微泡能黏附在两种细胞表面,而非靶向微泡在两种细胞的表面几乎无黏附.人胰腺癌CF-PAC1和PANC01细胞注射10 d后,20只裸鼠均于注射部分长出肉眼可见的实体肿瘤,瘤体最大直径为5～8 mm.超声分子成像显示,肿瘤组织内有靶向微泡充填.免疫组织化学检测显示,在裸鼠肿瘤组织里可见新生血管生成,血管内皮可见点状或条索状棕色反应物分布,提示有VEGFR2表达.结论 采用生物素-亲和素桥连的方法,可成功制备携带抗VEGFR2单抗的靶向超声微泡造影剂,且靶向造影剂在体外与人胰腺癌细胞结合具有高度的特异性.VEGFR2为靶点的肿瘤新生血管的分子显像,在分子水平进行胰腺癌早期诊断和抗肿瘤血管生成治疗方面具有广阔的前景.