【摘 要】
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目的:建立能够对流感病毒甲型和乙型进行区分的悬浮基因芯片技术,为甲型和乙型流感病毒的分型提供一种高通量的检测和鉴定技术. 方法:从GeneBank下载具有代表性的流感病毒
【机 构】
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海南医学院热带医学与检验医学院,海南海口 571101
【出 处】
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第九届粤桂琼检验医学学术会议暨海南省医学会检验医学专业委员会2015年学术年会
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目的:建立能够对流感病毒甲型和乙型进行区分的悬浮基因芯片技术,为甲型和乙型流感病毒的分型提供一种高通量的检测和鉴定技术.
方法:从GeneBank下载具有代表性的流感病毒基因组序列,利用生物信息学软禁进行序列比对,分别设计针对甲型和乙型流感病毒的简并引物和特异性探针,将设计好的引物和探针与GeneBank中所有的病毒序列进行比对,以验证其特异性.经探针合成和悬浮液相芯片制备获得用于甲型和乙型流感病毒分型的悬浮芯片.所有病毒在BSL-2生物安全实验室进行培养,经核酸提取后经反转录PCR进行扩增,与芯片杂交后经链霉亲和素欧联藻红蛋白标记,利用Luminex200检测仪进行检测.
结果:所检测甲型和乙型流感病毒均可获得特异性杂交信号,非特异性杂交信号不明显,将两种病毒混合,模拟混合病毒感染也可以得到相应的特异性杂交信号.
结论:本研究初步建立了甲型和乙型流感病毒分型的悬浮基因芯片检测技术,可用于流感病毒的高通量初步筛查和鉴定,并且可以进行混合感染样本的检测,为流感病毒的分型和鉴定提供了一种新的手段.
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