自体皮浆诱导脂肪干细胞向表皮细胞分化的实验研究

来源 :2013年全军烧伤外科学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ygyyy2012
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  目的:探讨与自体皮浆非接触式共培养诱导自体脂肪干细胞(ADSCs)向表皮细胞分化的可行性.方法:(1)取6例SD大鼠脂肪组织,用酶消化法分离、培养ADSCs,并于培养第2代行流式细胞仪检测CD49d、CD44和CD106等细胞表型,初步鉴定ADSCs; (2)实验分组:①1*1cm2大鼠皮浆+10%FBS DMEM;②1*1cm2大鼠皮浆+EGF(20μg/L)+10%FBS DMEM组;③含EGF (20 μ g/L)+10%FBS DMEM组;④10%FBS DMEM组.共培养7d.(3)于诱导后1d、3d、7d行显微镜下细胞形态学观察;行流式细胞仪检测各组ADSCs CK19、CK14等表皮细胞表型表达及细胞周期检测.结果:流式细胞仪鉴定脂肪干细胞表面表型CD49d、CD44和CD106阳性率分别为99.0%、95.2%和1.5%;实验组诱导后第7天,约56.8%ADSCs细胞形态发生改变,呈不规则形,并有少许突起;诱导第7天,各组细胞CK19阳性率分别为16.8%、23.4%、14.9%、1.2%; CK14阳性率分别为18.3%、26.2%、14.5%、1.6%,与对照组相比,CK19、CK14阳性率差异有统计学意义(P<0.01);诱导前ADSCs细胞周期:G1: 72.1%、G2: 3.8%、S:24.1%,诱导7天,单纯皮浆诱导组ADSCs细胞周期:G1: 25.4%、G2: 1.3%、S:73.3%.结论:自体皮浆可经非接触共培养方式诱导ADSCs向表皮细胞分化;诱导作用可被表皮生长因子加强.
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