H1N1亚型猪流感病毒中国分离株神经氨酸酶基因分子演化的研究

来源 :第六次人畜共患病学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hbb88191312
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的神经氨酸酶(NA)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树.研究结果表明,15株H1N1亚型SIV的NA基因核甘酸全长为1458bp,共编码477个氨基酸.15株H1N1亚型SIV的NA蛋白在58、63、68、88、146位都存在糖基化位点;但是,SW/GD/714/01和SW/GD/771/01在50位存在一糖基化位点,为"-NQS-",其余13株H1N1亚型SIV在50位无糖基化位点,却在44位存在"-NHS-"的糖基化位点;而且,SW/GD/714/01、SW/GD/771/01和其余13株H1N1亚型SIV的NA蛋白头部抗原位点,在328、332、334、339、340位的氨基酸不同;但是,15株H1N1亚型SIV在366位的氨基酸均为N,与所有参考毒株在此位的S不同.经同源性比较结果和进化树分析可见,SW/GD/714/01和SW/GD/771/01的NA基因明显属于类禽型H1N1猪谱系,其余13株H1N1亚型SIV的NA基因皆属于古典型H1N1猪谱系.
其他文献
根据禽流感病毒(AIV)编码核蛋白(NP)和编码血凝素(HA)基因序列,分别设计一对用来鉴定A型AIV特异性的引物(NP-F,NP-R),鉴定H和HAIV不同亚型的特异性引物(H-F,H-R;H-F,H-R),建立多重RT-PCR快速检测方法,可使每种病毒能同时扩增出两条带分别为:型(NP:330bp)和亚型(HA:550 bp,or HA:490bp).通过对105份样品进行检测,与血清学检测方
尼帕病毒病(Nipah Virus Disease,NVD)是最近发现的继英国疯牛病、台湾岛猪口蹄疫、香港禽流感后,又一引起世界各国广泛关注和恐慌的人、畜共患病.它严重危害猪和人类健康,是急性高度致死性传染病,发病率高,主要症状为神经症状神、震颤、惊厥和昏迷等,且进行性加重和呼吸道症状.从公共卫生的角度出发,本病应引起国内医学和畜牧兽医界人士的高度重视.本综述从病原学和流行学简单阐述该病的一些研究
用血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验对南京市5家农贸市场50份鸡血清样品进行了新城疫(ND)、禽流感(H型)抗体测定,结果ND抗体小于2的有36份,占72﹪,大于2的有14份,占28﹪;禽流感H抗体小于2的有18份,占36﹪,大于2的有32份,占64﹪.检测结果表明所采5家农贸市场50份鸡只ND和AI H抗体水平均比较低,潜在着感染这两种疫病的可能,需加强市场监测和产地检疫,加强免疫,以减少这两种
采RT-PCR方法对两株O型口蹄疫病毒的VP1基因进行了扩增和序列测定,结果表明两毒株VP1基因均为639bp,编码213个氨基酸.序列比较显示两毒株具有较大的基因差异,分别属于Cathay和ME-SA拓扑型.进一步将两毒株VP1基因分别亚克隆到原核表达载体pET-Trx中,构建重组质粒pETVP14和pETVP116,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG诱导.重组菌菌体裂解物SDS-PA
本试验以犬2型腺病毒全基因组重组质粒pPolyⅡ-CAV-2及其E3区重组质粒pVAX-E3为基础,通过Dra Ⅲ和Ssp Ⅰ双酶切,缺失25097bp-26141bp共1044bpE3区片段,按与编码链相同转录方向插入由CMV启动子、狂犬病病毒SRV9株糖蛋白基因、SV40 polyA构成的总长2424bp的表达盒,获得重组基因组质粒pPoly Ⅱ-CAV-2-CGS(34.7kb).以Asc
本试验以SspI酶切进行犬2型腺病毒全基因组E3区部分缺失,并插入由CMV启动子、狂犬病病毒SRV9株核蛋白、牛生长激素polyA构成的长2.4kb的表达盒.经AscI和PvuI双酶切游离重组全基因组,转染MDCK细胞,得到重组犬2型腺病毒.Western bloting检测表明,狂犬病病毒核蛋白在重组犬2型腺病毒中得到了表达.初步免疫试验显示,重组病毒可以诱导受试犬产生针对犬2型腺病毒和狂犬病病
基于目前FMD疫苗研究的现状及发展趋势,在详尽了解口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth disease virus,FMDV)分子结构及其生物功能,分析病毒抑制宿主免疫应答的分子成分,及激活宿主免疫细胞产生保护性免疫应答(中和抗体和CTL)的分子基础上,本研究提出以O型和A型FMDV主要结构蛋白VP1基因为基础,以非结构蛋白3ABC及结构蛋白VP4上的Th2细胞表位为辅助基因,将以上三个基因串
表达P36基因的重组菌BL21(6P-1-P36)经诱导表达,超声波裂解后高速离心,分别收集上清和沉淀.可溶性表达产物亲和层析纯化后用于检测;同时,用GST-P36包涵体沉淀腹腔注射免疫BALB/c小鼠(400μg/只).利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了一株能分泌特异性抗体的单克隆细胞株5A7-2.生物学特性鉴定表明,腹水单抗的间接ELISA效价为1:2.5×10;免疫球蛋白亚类为IgG.免疫印迹结
免疫原基因的密码子优化是提高DNA疫苗免疫保护效果的有效策略.鸡与哺乳动物细胞在蛋白翻译过程中具有相同的密码子编嗜性,但与A型流感病毒保护性免疫原HA蛋白氨基酸密码子使用频率存在着明显差异.为此,利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR法及限制酶切法构建了密码子优化的A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因(optiHA),并将其插入CMV启动子表达
以AIV H9亚型油乳剂灭活疫苗作为免疫原,免疫8wk BALB/c小鼠.采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗AIV H9亚型血凝素蛋白的mAb;采用ELISA和血凝抑制试验(HI)检测腹水mAb的效价;采用ELISA、HI、免疫荧光染色(IF)及Western-blot鉴定mAb的特异性.获得3株可稳定分泌特异性mAb的杂交瘤细胞株2A3、2H1和1C8,其腹水mAb的效价依次为1×10、1×10和5×