【摘 要】
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棉花粉蚧Phenacoccus solenopsis Tinsley 是一种新入侵的可能危害园林、水果、大田作物的害虫.该虫具有较强的生态可塑性,对高温、低温均具有较强的适应能力,在我国潜在
【机 构】
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华南农业大学昆虫学系,广东 广州510642
【出 处】
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第四届全国生物入侵大会暨青年创新论坛
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棉花粉蚧Phenacoccus solenopsis Tinsley 是一种新入侵的可能危害园林、水果、大田作物的害虫.该虫具有较强的生态可塑性,对高温、低温均具有较强的适应能力,在我国潜在分布区域广泛,可能适宜在中国北部更广泛的区域生存.为了阐明棉花粉蚧抗逆温的分子机制,在明确转录组序列基础上,研究了热胁迫下该虫实时定量PCR中最适内参基因和热激蛋白基因表达量的变化.本研究应用实时荧光定量PCR 技术测定了棉花粉蚧2 龄若虫、3 龄若虫和雌成虫α-tub,β-tub,rpl32,GAPDH,SDHA 和TBP共6 个候选内参基因在7 个不同温度(恒温18℃和 32℃,以及37℃,39℃,41℃,43℃和45℃热激处理1 h 并在26℃恢复1 h)处理下mRNA表达水平的稳定性;应用geNorm,Bestkeeper,Normfinder 和RefFinder 软件分析6 个基因表达的稳定性,并分析了3 个热激蛋白基因hsp70,hsp70-4,hsp90 的相对表达量.内参基因稳定性分析表明,在7 个不同温度处理下2 龄若虫和3 龄若虫中α-tub 最稳定,雌成虫中rpl32 最稳定;热激蛋白表达量分析表明,在18℃恒温处理条件下,2 龄粉蚧若虫的3 个Hsps 基因mRNA的相对表达量均比对照组低,在32℃恒温处理条件下,各龄期的3 个Hsps 基因的相对表达量均与对照组无显著差异;在37-45℃胁迫下,棉花粉蚧3 个龄期的3 个热激蛋白Hsps 基因的相对表达量随温度的升高总体呈增加趋势,相关性分析表明,除hsp70-4在雌成虫中的表达相关系数为0.225 外,其余均大于0.6,43℃和45℃胁迫下,各龄期的3 个热激蛋白相对表达量均显著高于对照组(P<0.05).α-tub 可作为棉花粉蚧2 龄若虫和3 龄若虫的内参基因,rpl32 可作为雌成虫的内参基因,棉花粉蚧热激蛋白基因的表达与温度呈正相关,热激蛋白在棉花粉蚧应对高温中起到重要作用.
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