【摘 要】
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利用RT-PCR方法扩增旋毛虫HSP70基因,将其扩增产物克隆到pEASY-Blunt Simple载体中,经限制性酶切后与pET-28a(+)载体连接,进一步转化至感受态细胞Transetta(DE3)中,用IPT
【机 构】
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东北农业大学,动物医学学院,黑龙江,哈尔滨 150030
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会
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利用RT-PCR方法扩增旋毛虫HSP70基因,将其扩增产物克隆到pEASY-Blunt Simple载体中,经限制性酶切后与pET-28a(+)载体连接,进一步转化至感受态细胞Transetta(DE3)中,用IPTG诱导表达重组旋毛虫HSP70.以纯化的重组HSP70制备多克隆抗体,并对HSP70进行免疫印迹分析及免疫组织化学染色.结果表明,重组质粒的鉴定和DNA测序均正确；SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,在70ku处获得一目的条带；免疫组织化学染色结果显示,该HSP70具有很好的免疫原性.证实,成功构建了重组表达质粒pET28a-HSP70,为深入研究旋毛虫HSP70的功能奠定了基础.
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