【摘 要】
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<正>Vps34是酿酒酵母中唯一的磷脂酰肌醇三磷酸激酶(PI3K),通过产生磷脂酰肌醇三磷酸(PI3P)调控细胞内的多种生理过程,如内吞运输,液泡蛋白分选及细胞自噬等。已报道小G蛋白V
【机 构】
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南京农业大学生命科学学院; 南开大学医学院;
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<正>Vps34是酿酒酵母中唯一的磷脂酰肌醇三磷酸激酶(PI3K),通过产生磷脂酰肌醇三磷酸(PI3P)调控细胞内的多种生理过程,如内吞运输,液泡蛋白分选及细胞自噬等。已报道小G蛋白Vps21的激活因子Vps9影响胞内PI3P的水平。我们的研究发现Vps9、Vps21和Vps8所在的模块调控细胞自噬,且Vps21模块蛋白缺失显著影响Vps34的胞内定位,使得Vps34不能正确定位到内体及自噬体装配位点PALS上。为了进一步探讨Vps21所在模块是否通过Vps34调控细胞自噬,我们检测了Vps21模块蛋白与Vps34之间的相互关系。酵母双杂交结果显示,Vps34只与Vps8有互作,而与Vps21和Vps9没有互作,且Vps34与Vps8的互作可通过BiFC方法得到验证。进一步分析发现Vps8的一些结构域是与Vps34互作及维持Vps34的胞内定位所必需的,因为只有这些结构域存在时方能与Vps34互作及恢复因Vps8缺失所导致的Vps34错误定位。这些结果表明,Vps8极有可能通过与Vps34互作调控Vps34的定位,从而调控内吞运输及细胞自噬,而Vps8的功能也受到Vps9激活Vps21的影响。
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