结核分枝杆菌热休克蛋白Hspl6.3及其合成肽在小鼠体内诱导的免疫应答

来源 :全军第十届实验动物学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaojas
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  目的 比较结核分枝杆菌Hsp16.3和Hsp16.3合成肽在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力.方法80只BALB/e小鼠随机分5组共免疫3次,间隔2周.分别于O、2、4、6、8周采集血液,ELISA法检测在抗原Hsp16.3和Hsp16.3合成肽包被时血清中的抗体浓度及第8周时血清中的抗体滴度.末次免疫完成后4周,取每组8只免疫小鼠分离脾淋巴细胞,用Hsp16.3和Hsp16.3合成肽分别刺激后.MTT法测定脾淋巴细胞的增殖指数,夹心ELISA法检测同样抗原刺激下脾淋巴细胞诱生的IFN-γ水平.每组剩余小鼠用H37Rv毒株攻击,4周后取小鼠脾脏分离脾淋巴细胞,倍比稀释后涂平板,3周后计数CFU.结果 抗Hsp16.3和Hsp16.3合成肽的抗体在免疫的前4周均增长迅速,而后趋于缓和.Hsp16.3/DDA/MPL、Hsp16.3合成肽/DDA/MPL、Hsp16.3合成肽/FIA、BCG组和生理盐水组在第8局时抗Hsp16.3的抗体滴度分别为1:3000、l:1500、1:1500、l:500和1:100,抗Hsp16.3合成肽的抗体滴度分别为1:2000、l:2000、1:1000,1:500和1:100;在Hsp16.3和其合成肽的刺激下,各组平均刺激指数分别为(3.13土0.18)和(2.895±0.13)、(3.21±0.21)和(3,54±0.2)、(2.395±0.15)和(3.125±0.12),(1.67±0.12)和(1.93±0.14),(1.04±0.09)和(1.16±0.08);在同样抗原刺激下,各组诱生的IFN-γ水平分别为(182.43士6.01)pg/mL和(182.43±8.67)pg/mL、( 193.522±9.26) pg/mL和(198.915士6.16)ps/mL、( 179.135±7.83) pg/mL和(188.32±5.13) pg/mL,(274.56±10.26)pg/mL和(283.47±6.19)pg/mL,(71.14±3.34)pg/mL和(72.91±2.45)pg/mL;各组脾脏的荷菌数分别为(6.74±0.14)、(6.60±0.13)、(6.81±0.28)、(5.95±0.17)和(7.82±0.21).结论 二者在免疫学特性方面各有优势,提示Hsp16.3和Hep16.3合成肽均有望成为TB役苗的候选组分.
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