【摘 要】
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目的 自噬是细胞内降解途径,其可以被许多非编码RNA 调节. ciRS-7(也称为CDR1as)是目前相对较好研究的环状RNA.在我们最近的研究中,我们发现ciRS-7 在食管鳞状细胞癌(ESCC)中上调,并作为癌基因通过海绵miR-876-5p 加速ESCC 进展.同时,另一项研究表明,ciRS-7 在三阴性乳腺癌(TNBC)中高表达,并作为miR-1299 的ceRNA 起作用,以维持TNBC
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目的 自噬是细胞内降解途径,其可以被许多非编码RNA 调节. ciRS-7(也称为CDR1as)是目前相对较好研究的环状RNA.在我们最近的研究中,我们发现ciRS-7 在食管鳞状细胞癌(ESCC)中上调,并作为癌基因通过海绵miR-876-5p 加速ESCC 进展.同时,另一项研究表明,ciRS-7 在三阴性乳腺癌(TNBC)中高表达,并作为miR-1299 的ceRNA 起作用,以维持TNBC 细胞的高迁移和侵袭特性.但是其在肿瘤细胞中对自噬产生的影响还未曾研究.本文旨在探讨ciRS-7 对自噬的影响及其分子机制.方法 Western blot 分析P62 及LC3 蛋白表达水平来研究对自噬的影响.通过共聚焦显微镜观察转染的LC3 荧光质粒来确定自噬体数量.进行免疫沉淀和荧光素酶报告基因实验,观察ciRS-7 和miR-1299 之间的相互作用,以及 miR-1299 通过EGFR 影响自噬的下游信号通路.结果 转染环状RNAciRS-7 后自噬相关蛋白 p62 表达增高,LC3 表达水平明显降低.免疫沉淀和荧光素酶报告基因显示,ciRS-7 作为miR-1299 的海绵发挥作用,miR-1299 能降低自噬.其分子机制为,miR-1299 通过直接结合EGFR 的 3UTR 区域发挥作用,Akt-mTOR 途径位于EGFR 的下游,并且在调节自噬的进展中起关键作用.结论 循环RNA ciRS-7 通过作为miR-1299 海绵作用靶向EGFR 信号传导而抑制ESCC 细胞的自噬.
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