【摘 要】
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血吸虫在宿主体内的发育和长期寄生生活与其逃避宿主免疫攻击的能力是密切相关的.分离鉴定和免疫逃避相关的虫体分子,研究其功能对了解血吸虫免疫逃避机理及疫苗研究有重
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点实验室,上海 200241
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会
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血吸虫在宿主体内的发育和长期寄生生活与其逃避宿主免疫攻击的能力是密切相关的.分离鉴定和免疫逃避相关的虫体分子,研究其功能对了解血吸虫免疫逃避机理及疫苗研究有重要帮助.研究表明TOR蛋白是一种表面抗原受体,可以结合补体C2a,推测其可以通过抑制补体激活途径,而在免疫逃避过程中起重要作用.为研究日本血吸虫TOR(sjTOR)受体的特性和功能,利用PCR扩增到SjTOR基因并进行了生物信息学分析,结果表明SjTOR的ORF长度为1245 bps,编码414个氨基酸,比对分析显示与曼氏血吸虫TOR(SmTOR)、埃及血吸虫TOR(ShTOR)相似性分别为77.0％、和72.0％.序列分析显示,SjTOR不含信号肽,具有5个N糖基化位点；跨膜结构预测表明,SjTOR包含四个跨膜结构域.根据SjTOR第一个膜外区(Sj TOR-ed1,AA 47-168)序列设计合成引物,构建含SjTOR第一个膜外区(SjTOR-ed1)基因的重组表达质粒pET-28a-SjTOR-ed1,在BL21(DE3)大肠杆菌中诱导表达,并用His-binging亲和层析纯化获得重组蛋白rSjTOR-ed1,分子量约为14 kDa.Western blot分析显示rSjTOR-ed1能被日本血吸虫阳性小鼠血清识别,用重组蛋白rSjTOR-ed1免疫小鼠,能够诱导产生较高水平的特异性IgG抗体.结果表明重组蛋白rSjTOR-ed1具有良好的免疫原性.结果为开展研究日本血吸虫TOR受体的功能及评估其作为抗血吸虫疫苗候选分子提供了基础.
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