本试验旨在建立牛奶中三氮脒残留量的反相高效液相色谱测定方法。样品采用1％乙酸甲醇为提取液，经离心分离、浓缩富集后，用10％的乙腈水复溶，过滤后检测。色谱条件为：色谱柱为Thermo ODS-2 HYPERSIL(250×4.6mm，5μm)；流动相为乙腈-0.34％磷酸水溶液(7：93，v/v)，用三乙胺调节PH值为2.4：柱温35℃，检测波长370 nm，流速1.0mL/min，进样量为20μl。结果显示：三氮脒在0.07～8μg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为70％～110％，批内RSD为1.6％～3.2％，批间RSD为2.9％～6.8％。最低检测限为0.03μg/mL，定量限为0.07μg/mL。该方法具有灵敏、准确、简便、快速、重现性好等优点，适用于牛奶中三氮脒确证检测。