【摘 要】
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目的 分离版纳微型猪骨髓间充质干细胞,观察传代对GFP表达的影响。方法 采集4月龄版纳微型猪的骨髓,在含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养液中分离间充质干细胞,并根据其形态学、抗原标志表达和分化潜能给予鉴定。间充质干细胞与GFP病毒载体共培养后,荧光显微镜下观察GFP的表达,流式细胞仪检测传代后间充质干细胞GFP表达率的变化。结果：采用含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养液直接培养骨髓,可
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目的 分离版纳微型猪骨髓间充质干细胞,观察传代对GFP表达的影响。方法 采集4月龄版纳微型猪的骨髓,在含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养液中分离间充质干细胞,并根据其形态学、抗原标志表达和分化潜能给予鉴定。间充质干细胞与GFP病毒载体共培养后,荧光显微镜下观察GFP的表达,流式细胞仪检测传代后间充质干细胞GFP表达率的变化。结果：采用含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养液直接培养骨髓,可以分离到旋涡状生长、高表达CD13、CD29、CD90、CD105的成纤维细胞样的间充质干细胞,并可诱导分化为脂肪、骨、软骨细胞。间充质干细胞与GFP共培养3天即可观察到GFP的表达,最佳MOI值为50,最佳共培养时间为6天,传代后间充质干细胞GFP表达率呈下降趋势,但传代4代GFP表达率的变化没有显著差异。结论 采用含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养液可以从少许版纳微型猪骨髓中分离到间充质干细胞,GFP转染是标记间充质干细胞的有效方法,连续传代4代不会显著影响GFP的表达。
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