杜仲叶提取物中绿原酸的纯化及其体外抑菌效果的研究

来源 :中国畜牧兽医学会兽医内科与临床诊疗学分会第八届代表大会暨学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a5823869
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  该研究旨在确定杜仲叶提取物中绿原酸的纯化工艺,并通过指纹图谱对其质量进行控制,考察其对大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、蜡样芽胞杆菌(B.cereus)、白色葡萄球菌(S.albus)、乳房链球菌(S.uberis)、停乳链球菌(S.dysgalactiae)的体外抑菌效果.试验通过絮凝沉淀法和大孔吸附树脂法对样品中绿原酸进行分离纯化;采用高效液相色谱法建立其指纹图谱;采用滤纸片法和连续梯度稀释法确定其抑菌效果和最小抑菌浓度;含量测定采用紫外分光光度和高效液相色谱法.结果显示:①絮凝沉淀最佳工艺为:10 mL pH=5的样品中添加1%醋酸壳聚糖1 mL,60℃水浴搅拌4min,4℃静置4h,过滤;②NKA-Ⅱ树脂吸附最佳工艺为:样品溶液pH=4,稀释6倍,上样体积3.5 BV,上样速度2 BV/h,洗脱剂为70%乙醇,洗脱速度2 BV/h,用量2 BV;③纯化的绿原酸对6种细菌的抑菌环直径分别为13.44、18.12、13.56、14.00、13.66、13.00 mm;对S.aureus高敏,其他5种细菌中敏;S.uberis、S.dysgalactiae最小抑菌浓度为0.5 g/mL,绿原酸含量为7.20 mg/mL,其他4种细菌最小抑菌浓度为0.25 g/mL,绿原酸含量为3.58 mg/mL;④样品的指纹图谱相似度均大于0.9.综上所述,絮凝沉淀和大孔吸附树脂法联用可有效分离绿原酸;纯化的绿原酸可通过试验建立的指纹图谱控制质量;纯化的绿原酸对E.coli、Saureus、S.uberis、S.dysgalactiae、B.cereus、S.albus均有抑制作用.
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