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目的:成骨细胞主导的骨形成与破骨细胞主导的骨吸收维持着骨骼系统的骨代谢,当破骨细胞的形成和骨吸收功能发生异常时,就会导致例如骨质疏松症、骨硬化症等疾病[1,2].临床、动物实验都证实脉冲电磁场(PEMF)有良好的促进骨形成的作用[3,4].然而在细胞层面上,PEMF 作用于破骨细胞时的最优参数选择以及作用原理都不明确.因此,选取不同强度的PEMF 刺激破骨细胞前体细胞,观察其对破骨细胞的生成、分化以及骨吸收功能的影响,可以为临床研究提供理论支撑.方法:将RAW 264.7 细胞种于六孔板或新鲜的牛股骨骨片上,加入RANKL(50ng/ml),每天施加不同强度(0,5 高斯,10 高斯,20 高斯,30 高斯)的PEMF 刺激2h,共7 天.然后通过TRAP 染色、细胞骨架染色、骨吸收陷窝测定、RT-PCR和Western blot 等实验来检测不同场强刺激对破骨细胞形成个数、微丝细胞骨架结构、破骨细胞骨吸收功能,以及RANK/RANKL/OPG 系统中各基因和蛋白的表达.结果:TRAP 染色结果显示,与对照组(0G)相比,低强度(5G,10G)的PEMF 明显抑制了破骨细胞的生成(P<0.001),而30G 组生成的破骨细胞数目明显增多(P<0.01).细胞骨架染色结果显示5G组及10G 组的破骨细胞具有未成熟破骨细胞特征的树突状伪足,而20G,30G 组生成的都为成熟的边缘光滑的破骨细胞,细胞骨架呈网状排布.骨吸收陷窝的测定表明,破骨细胞的骨吸收功能在30G 的PEMF 作用下显著增强,表现为形成的陷窝面积变大(P<0.0001).基因、蛋白表达检测结果显示,低强度的PEMF 刺激下生成的破骨细胞中的RANKL/OPG 比值减小,而高强度的PEMF 刺激下此比值增加.结论:PEMF 作为一种经济、无创、副作用小的物理治疗方法,可以双向调控破骨细胞的生成以及其骨吸收功能,并与OC 的RANK/RANKL/OPG系统的调控有关.低强度的PEMF 可以减少破骨细胞的生成量,减缓其生长及成熟速率,以此降低破骨细胞的骨吸收功能,而高强度的PEMF 可以促进破骨细胞生成及骨吸收功能,为临床治疗骨代谢疾病提供新的参数参考以及理论依据.