本研究建立一种简便、灵敏而又特异的环介导等温扩增技术(Loop-mediated Isothermal Amplification Method，RT-LAMP)用于H3亚型流感病毒的检测。根据GenBank中注册的H3N2亚型猪流感病毒(SIV)HA基因保守区的序列，设计一组对应HA序列6个区域的4条特异性引物进行核酸扩增，建立RT-LAMP反应体系，优化LAMP反应条件，等温扩增反应条件为65℃保温60min。扩增后产物可用核酸染色剂SYBRⅠ进行鉴定，检测结果可视(阴性为橙黄色，阳性偏绿色)；同时用特异性内切酶KpaⅠ进行酶切鉴定。用已建立的RT-LAMP技术检测临床样品，检测结果与病毒分离、RT-PCR方法符合率均达到100％。RT-LAMP技术整个检测过程只需1h～2h，不需要PCR仪和成像系统，仅需要一恒温水浴锅即可完成试验。通过特异性、敏感性试验，验证了建立RT-LAMP技术可以作为一种操作简单，灵敏性、特异性高的检测H3亚型猪流感病毒的技术。