麦根腐平脐蠕孢分泌蛋白基因CsSP3的功能研究

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麦根腐平脐蠕孢(Bipolaris sorokiniana),有性态为禾旋孢腔菌(Cochliobolus sativus),是小麦上一种可以引起根腐、叶斑和黑胚等多种症状的重要病原真菌,广泛分布于世界各地,可为害多种禾谷类作物及杂草。麦根腐平脐蠕孢引起的小麦根腐病在英国、法国、德国、印度以及北美的加拿大、美国等地发生严重为害,造成小麦大量减产,也是我国小麦根腐病的主要病原之一。近年,小麦根腐病在我国主要小麦主产区发生呈现不断加重趋势,部分田块为害减产达10%~20%,严重地块达30%以上,对小麦生产造成了一定危害。本课题组在麦根腐平脐蠕孢侵染小麦过程的转录组数据中,筛选了4个表达模式相似的高表达基因CsSP1-4,其编码的蛋白在N端都具有经典信号肽序列,初步推定为分泌蛋白。其中CsSP3基因含有294个核苷酸,编码的蛋白含有18个氨基酸的信号肽,8个Cys,1个糖基化位点,2个丝氨酸和2个赖氨酸磷酸化位点;软件分析表明,CsSp3为胞外分泌;BLAST分析在其他真菌中没有找到同源类似物。采用split-marker基因敲除方法,成功获得△cssp3缺失突变体。△cssp3突变体在CM平板培养基上生长速率较野生型菌株变慢,洋葱内表皮侵染实验显示突变体侵染菌丝发育延迟,对小麦的致病性降低。初步研究结果表明:CsSP3参与麦根腐平脐蠕孢的营养生长和侵染菌丝发育过程。相关的功能互补和编码蛋白的亚细胞定位等实验正在进行中。
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