THP-1来源树突状细胞的诱导培养及鉴定

来源 :2016年广州市医学会耳鼻咽喉科学分会学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:snmydmyd
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  目的:诱导培养人单核细胞系THP-1,获得大量高纯度的树突状细胞,为体外过敏原性评价提供实验材料.方法:用含rhIL-4 (1500 U/mL)和rhGM-CSF(1500 U/mL)的PRIM 1640完全培养基诱导培养THP-1.5天后收集细胞,用TNF-α和离子霉素联合刺激24 h.分别收集刺激前和刺激后的细胞,光镜观察细胞形态特征,并用流式细胞仪检测DC表面标记CD11c和CD209、成熟标志CD83及共刺激分子CD80、CD86的表达情况.结果:THP-1细胞经rhIL-4和rhGM-CSF诱导培养后,CD11c+CD209+细胞百分比显著升高,均达到60%~70%,表明成功诱导为未成熟的树突状细胞.TNF-a和离子霉素联合刺激前后CD11c+CD209+细胞的百分比没有显著差异.但刺激后的细胞具有树突状细胞的典型形态,流式细胞仪检测显示树突状细胞成熟标志CD83和共刺激分子CD80,CD86的表达水平增高.结论:获得大量的高纯度的人单核来源的树突状细胞,为后期的过敏原体外评价实验奠定基础.
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